|
Кислотно-основное состояние крови и исследование электролитного состава сыворотки проводилось на аппаратах "АВЬ -500м (США), "НиМАЬУХЕК 2000" (США) соответственно. Комплексная оценка морфо-функциональной зрелости осуществлялась по системе ОиЬо\укг (1981г.), являющейся наиболее оптимальной для определения зрелости недоношенных детей. Описание состояния ребенка проводилось по следующим признакам: привыкание (свет, трещетка), движение и мышечный тонус (поза; тонус, тракция с рук, ног; подколенный угол, отставание и поднимание головы, вентральная суспензия, высвобождение руки в положении лежа на животе, самопроизвольные движения, тремор, вздрагивания, аномалии движения или положения), рефлексы, поведенческие признаки. Использование этой схемы позволяет зафиксировать особенности неврологического статуса новорожденного на момент осмотра и при дальнейшем наблюдении определить динамику отдельных неврологических признаков и состояния новорожденного в целом. Для оценки поражения нервной системы использовалась классификация под редакцией Н.Н. Володина, А.С. Петрухина (2000 г.), с помощью которой выставлялась степень тяжести церебральной ишемии. 3. Иммуноферментный анализ применялся для определения уровня в сыворотке крови нейроспецифического белка астроцитарной глии 3-100, маркера апоптоза, «рецептора смерти», ИЯ5; молекулы клеточной адгезии АЬСАМ. Все методики основаны на принципе количественного иммуноферментного анализа сэндвичевого типа. (ЕЫ5А Ептуше Ыпкес1-1штипо-8огЬеп1 Аззау). Образцы крови отбирали из пупочной вены при рождении (новорожденные из контрольной группы), а в последующие сроки, путем аспирации из центральных катетеров (пупочный, подключичный, транскутанный) в объеме 0,3 1,0 мл. Кровь центрифугировали в течение 3-4 60 |
диагностической и лечебной целью проводились люмбальные и вентрикулярные пункции. Кислотно-основное состояние крови и исследование электролитного состава сыворотки проводилось на аппаратах "АВЬ -500" (США), "НиМАЬУ2ЕК 2000" (США) соответственно. Комплексная оценка морфо-функциональной зрелости осуществлялась по системе ОиЬо\укг (1981г.), являющейся наиболее оптимальной для определения зрелости недоношенных детей. Описание состояния ребенка проводилось но следующим признакам: привыкание (свет, трешетка), движение и мышечный тонус (поза; тонус, тракция с рук, ног; подколенный угол, отставание и поднимание головы, вентральная суспензия, высвобождение руки в положении лежа на животе, самопроизвольные движения, тремор, вздрагивания, аномалии движения или положения), рефлексы, поведенческие признаки. Использование этой схемы позволяет зафиксировать особенности неврологического статуса новорожденного на момент осмотра и при дальнейшем наблюдении определить динамику отдельных неврологических признаков и состояния новорожденного в целом. Для оценки поражения нервной системы использовалась Гклассификация под редакцией Н.Н'Володина, А.С. Петрухина (2000 г.), с помощью которой выставлялась степень тяжести церебральной ишемии. 3. Иммуноферментный анализ применялся для определения уровня в сыворотке крови ненроспецифических белков: белка астроцитарной глии 8-100, мозгового нейротрофического фактора (ВЭЫР), цилиарного нейротрофического фактора (СЫТР); васкулоэпдотслиального фактора роста (УЕОР); маркера апоптоза, «рецептора смерти», РЕ5; молекулы клеточной адгезии АЬКАМ. Вес методики основаны на принципе количественного иммуноферментного анализа сэндвичевого типа. (ЕЫ8А Епгугпе Ыпкес1-1тшипо-8огЬеп1 Аззау). 3 Образцы крови отбирали из пупочной вены при рождении (новорожденные из контрольной группы), а в последующие сроки, путем аспирации из центральных катеторов (пупочный, подключичный, транскутанный) в объеме 0,3 1,0 мл. Кровь центрифугировали в течение 3-4 минут при 2000 Полученную сыворотку ал и квотировал и, замораживали и хранили при температуре 20° С нс более 2 месяцев. Харак теристика анализа. Точность определения. Точность определения внутри серии определялась путем 20 кратного тестирования 3 образцов с известной концентрацией в одном микропланшете. Точность определения между сериями определялась путем исследования 3 образцов с известной концентрацией в 40 различных постановках. ЗЛЛЭпрсделепис содержания белка 8-100 проводили твердофазным иммуноферментиым методом, используя реактивы фирмы СапА§ (Швеция). Стандарты и образцы пациентов (50мкл) инкубируются вместе с биотинилированными анти-8-100 моноклональными антителами (полученными из мьиПи) 100 мкл в покрытых стрсптавидииом ячейках микропланшета. В процессе инкубации белок 8-100, содержащийся в стандартах или образцах пациентов, адсорбируется на покрытых Л.— —...................... л"'П1-8моноклональными антителами. Стрипы затем промываются 3 раза и стрсптавидииом ячейках микропланшета с биотинршфованными ант^Б-ЮО инкубируются, встряхивая 2 часа при комнатной температуре с анти-8-100 моноклональными антителами, меченными пероксидазой хрена. После промывки в каждую ячейку добавляется буферный субстрат 100 мкл и инкубируется 1 час, встряхивая, при комнатной температуре, проходит ферментная реакция. Производится промывка 6 раз. Добавляется субстрат ТМБ (перекись водорода и 3,3,5,5-тетраметилбе11зидин100 мкл. Инкубируется 3-й раз 30 минут, при комнатной температуре, встряхивая. В процессе реакции развивается голубая окраска, если присутствует антиген. 4 диагностической и лечебной целью проводились люмбальные и вентрикулярные пункции. Кислотно-основное состояние крови и исследование электролитного состава сыворотки проводилось па аппаратах "АВЬ -500" (США), "НЦМАЬУ2ЕК 2000" (США) соответственно. Комплексная оценка морфо-функциональной зрелости осуществлялась по системе ОиЫпуЦг (1981г.), являющейся наиболее оптимальной для определения зрелости недоношенных детей. Описание состояния ребенка проводилось по следующим признакам: привыкание (свет, трещетка), движение и мышечный тонус (поза; тонус, тракция с рук, ног; подколенный угол, отставание и поднимание головы, вентральная суспензия, высвобождение руки в положении лежа на животе, самопроизвольные движения, тремор, вздрагивания, аномалии движения или положения), рефлексы, поведенческие признаки. Использование этой схемы позволяет зафиксировать особенности неврологического статуса новорожденного на момент осмотра и при дальнейшем наблюдении определить динамику отдельных неврологических признаков и состояния новорожденного в целом. Для оценки поражения нервной системы использовалась Гклассификация под редакцией Н.ШЗолодина, А.С. Петрухина (2000 г.), с помощью которой выставлялась степень тяжести церебральной ишемии. 3. Иммунофсрмснтный анализ применялся для определения уровня в сыворотке крови нейроспецифических белков: белка астроцитарнойглии 8-100, мозгового нейротрофического фактора (ВОЫР), цилиарного нейротрофического фактора (СЫТР); васкулоэндотслиалыюго фактора роста (УБОР); маркера апоптоза, «рецептора смерти», ГЖ5; молекулы клеточной адгезии АЬКАМ. Все методики основаны на принципе количественного иммуноферментного анализа сэндвичсвого типа. (Е1Л8А Епгуте 1лпкесМттипо-8огЬеп1 Аззау). 3 |