|
b I 228 Одной из причин функциональной недостаточность энзимов,,в том числе фер-ь й 4 4 ментов-антиоксидантов, может являться образование антител к ним. Антиоксиt t дантная система организма не может выполнять свои функции изолировано; с4 ь ■ I ь ней тесно связана система пуринового метаболизма. Иммунологические нару-, t 1 « * " Iпения, связанные с изменением пуринового метаболизма,у больных РЗ, рась I I , смотрены пока в единичных работах [40; 98,247].4 * I Ч ■ ь В* нашей работе была предпринята попытка проведения, комплексной • ’’ * * I Я оценки изменений энзиматической и иммунологической активности основных' г * " * Г ■ •i ферментов АОС (СОД ГР; КАТ, ЦП) и ПМ (АДА,.5'-НТ, ПНФ; ГДА, КО) при9 . Г * дегенеративно-дистрофических (остеоартроз) и.воспалительных (ревматоидный* V ♦ артрит) заболеваниях суставов,.а также причин,.способных оказывать влияние» * на их функционирование.^ I I i * 4 * Имеющиеся1;в настоящий; момент данные литературы об изменении ак-* . k * * • f тивности.различных ферментов,при взаимодействии со специфическими’анти-4 $ щ 9 » р ____ • _ « , телами противоречивы [12,.46; 118, 293]. Поэтому рассмотрение вопросов, свя’ I ■ * Ш занных с;изучением изменения;ферментативнойактивности изучаемых энзимов I * f Щ i ь * при взаимодействии со специфическими’иммуноглобулинами представляло on-т * ч % Р ' , * t ределенный интерес и;было оправдано в контексте данной работы. Предполагая; что антитела1кСОД.ГР; КАТ, ЦП;,АДА, 5'-НТ, ПНФ; ГДА; КО способны 1 . i F * ‘ оказывать влияние на их ферментативную активность, мы провели in vitro опыты по изучению взаимодействия? иммобилизированной и растворимой форм* I , 1 ферментов;с полученнымшпредварительно соответствующими антителами,,из-1 ♦ ■ " • < мерив затем ферментативную активность. После.взаимодействия каждого фер-■ ч 4 Ч мента с соответствующими «чистыми» антителами было выявлено снижение* 1 * ферментативной активности СОД ГР, КАТ, ЦП, АДА, 5-НТ, ПНФ,.ГДА раз-* ■ / ■ » ~ личной степени выраженности. Следует отметить, что изменение ферментатив■ ■ ‘ ч ■ а " , ' ► ♦ ной активности изучаемых энзимов было; различным; при использовании рас, ( 1 , , в * • ’ ' 4 * . . творимой и иммобилизированной форм ферментов; Так,.например,.для-* .. . 1 * ■# I ГР, КАТ, ЦП, АДА, 5 -НТ и ПНФ наблюдалось снижение активности от 35% до 50%. Ферментативная; активность, иммобиллизированной ГДА практически |
Иммобилизация биологически активных веществ происходила в поверхностном слое "двойной" гранулы, что позволило создать высокую концентрацию антигена именно в реакционно активной зоне, качественно и количественно увеличив сорбционную емкость препарата. Процедура иммобилизации используемых энзимов не изменяла их ферментативной активности, приводила к стабилизации фиксируемого фермента, повышая устойчивость к внешним воздействиям, благодаря чему созданные препараты имели длительный срок хранения. Несомненным преимуществом проведения полимеризации биологически активных веществ с целенаправленным ориентированием химических групп, входящих в антигенные детерминанты, является возможность фиксации в полиакриламидном носителе значительного количества антигена, что способствовало повышению чувствительности используемого метода иммунодиагностики для выявления соответствующих аутоантител. I В нашей работе была предпринята попытка проведения комплексной I оценки изменений энзиматической и иммунологической' активности трех основных ферментов гуаниновой ветви пуринового метаболизма (5'-НТ, ПНФ и ГДА) при ревматоидном артрите, а также' причин, способных оказывать влияние на их функционирование. Ранее была показана возможность образования аутоантител к 5'-НТ при ревматоидном артрите [21], но результатов изучения антител к ПНФ и ГДА при РА опубликовано не было. В настоящем исследовании нам впервые удалось продемонстрировать связь ферментных и иммунных механизмов развития ревматоидного артрита через выработку антител к основным ферментам гуаниновой ветви пуринового катаболизма (5'-НТ, ПНФ и ГДА). Достаточный процент положительных результатов определения АТ к 5'-НТ, ПНФ’и ГДА у больных РА (соответственно у 53,9%, 59,5% и 44,9%) позволяет предположить, что механизм образования аутоантител к данным ферментам долi |