|
порта, клеточного роста, синтезе белков фиброзной ткани, активации лимфоцитов, нейротрансмиссии [272]. 5'-НТ участвует в регуляции энергетического метаболизма и влияет на аденилатный заряд клетки [268]. Фермент способствует поступлению экзогенных нуклеотидов внутрь клетки, участвует в регуляции созревания лимфоцитов и его дефицит связывают с гипогаммаглобулинемией, приводящей к тяжелым иммунным расстройствам. Предполагается участие 5'-НТ в уменьшении содержания активной т-РНК и последующем распаде белка. Установлена роль 5'НТ в регуляции агрегации тромбоцитов, а также процессов возбуждения в центральной нервной системе. Известно 3 основных класса 5'-нуклеотидаз —один из плазменной мембраны и два в цитозоле. Цитозольные ферменты получили название Кт-нуклеотидаз и 5'(3')-нуклеотидаз [291]. Энзим, локализованный на плазменной мембране, получил название мембранного маркера CD73 (молекулярный вес 69 кДа). Фермент связан с внутриклеточным филаментом актином и белками внеклеточного матрикса ламилином и фибронектином, экспрессируется на Т и В-лимфоцитах, но не на натуральных киллерах [113]. CD73 запускает процесс образования .сигнальных внутриклеточных метаболитов при активации.лимфоцитов, а также передачу сигнала в нейронах. Имеются доказательства влияния1экто-5'-НТ. на процессы»регенерации, пролиферации глиальных клеток [252]. клинической биохимии чаще различают 2 формы. 5'-НТ мую (цитозольную) и мембраносвязанную, или экто-5'-НТ, причем последняя расположена на внешней плазматической клеточной мембране [198]. Обе формы содержат высокие концентрации фосфолипидов, проявляют одинаковую активность в отношении 5'-АМФ и 5'-ГМФ. Причем в сыворотке крови присутствуют обе формы 5'-НТ, и экто-5'-НТ преобладает. В синовиальной жидкости сустава 2/3 5'-НТ находится в растворимой форме, а 1/3 —в мембраносвязанной [338]. 5'-НТ относится к классу гидролаз, действует на сложные эфирные связи фосфомоноэстеров. Состоит из одной полипептидной цепи и представляет собой термостабильный глико-(сиало)протеид из 589 аминокислотных остатков [342]. Молекулярные массы 5'-НТ, несмотря на видовые различия животных, достаточ |
По данным рентгеноструктурного анализа (разрешение 1,7 А) 5'-НТ из E.coli представляет собой белок, в активном центре которого в «ущелье» между двумя доменами расположены два иона цинка. Считается, что эти ионы металлов совместно с остатками аспарагина и гистидина являются основными участниками каталитического процесса [131]. На С-конце 5'-НТ человека содержится уникальная последовательность остатков девяти глутаминовых и четырех аспарагиновых кислот, удаление которых методами генной инженерии приводит к глубоким изменениям в свойствах фермента (резкому снижению специфической активности и повышению чувствительности к ингибированию неорганическим фосфатом в присутствии АМФ), обусловленным потерей способности к ассоциации и диссоциации субъединиц фермента [188]. Считается, что 5'-НТ является энзимом, связанным с клеточной мембраной, и играет ключевую роль в генерации аденозина —потенциального*вазодилататора. Кроме того;, 5'-НТ принимает участие в клеточном движении, процессах транспорта, клеточного роста, синтезе белков фиброзной ткани, активации * лимфоцитов, нейротрансмиссии [156]. 5'-НТ участвует в регуляции энергетического метаболизма и влияет на аденилатный заряд клетки [152]. Фермент способствует поступлению экзогенных нуклеотидов внутрь клетки, участвует в регуляции созревания лимфоцитов и его дефицит связывают с гипогаммаглобулинемией, приводящей к тяжелым иммунным расстройствам. Предполагается участие 5'-НТ в уменьшении содержания активной т-РНК и последующем распаде белка. Установлена роль 5'-in ' в регуляции агрегации тромбоцитов; а такJ же процессов возбуждения в центральной нервной системе. Известно 3 основных класса 5'-нуклеотидаз —один из плазменной мембраны и два Цитозольные ферменты получили название К тнуклеотидаз и 5'(3')-нуклеотидаз [169]. Энзим, локализованный на плазменной мембране, получил название мембранного маркера CD73 (молекулярный вес 69 кДа). Фермент связан с внутриклеточным филаментом актином и белками внеклеточного матрикса ламилином и фибронектином, экспрессируется на Т и В лимфоцитах, но не на натуральных киллерах [54]. CD73 запускает процесс образования сигнальных внутриклеточных метаболитов при активации лимфоцитов, а также передачу сигнала в нейронах. Имеются доказательства влияния экто-5'-НТ на процессы регенерации, пролиферации глиальных клеток [141]. В клинической биохимии чаще всего различают 2 формы 5'-НТ: растворимую (цитозольную) и мембраносвязанную, или экто-5'-НТ, причем последняя расположена на внешней плазматической клеточной мембране [ПО]. Обе формы содержат высокие концентрации фосфолипидов, проявляют одинаковую активность в отношении 5'-АМФ и 5'-ГМФ. Причем в сыворотке крови присутствуют обе формы 5'-НТ, и экто-5'-НТ преобладает. В синовиальной жидкости сустава 2/3 5'-НТ находится в растворимой форме, а 1/3 —в мембраносвязанной [198]. 5'-НТ относится к классу гидролаз, действует на сложные эфирные связи фосфомоноэстеров. Состоит из одной полипептидной цепи и представляет со* бой термостабильный глико-(сиало)протеид из 589 аминокислотных остатков [201]. Молекулярные массы 5'-НТ, несмотря на видовые различия животных, достаточно близки (от 48000 до 70000). Однако, обнаружение форм 5'-НТ с молекулярной массой (из Ж 134000, из печени быка 140000, из цитозоля эмбрионов —165000), что позволило исследователям прийти к заключению о наличии у энзима субъединиц и его димерной структуре [82]. Доказано наличие множественных молекулярных форм 5'-НТ —изоферментов [160] Из эритроцитов человека выделено два изофермента 5'-НТ, преимущественно гидролизирующие пиримидин 5'монофосфаты и пиримидин З'монофосфаты соответственно. Кинетический анализ показал, что первый изофермент обладал свойствами фосфотрансфераз, перенося фосфатный остаток на различные нуклеозиды, включая их аналоги, используемые для химиотерапии злокачественных новообразований и для лечения аутоиммунных заболеваний [78]. Cunha и соавт. показали, что антисыворотка против 5'-НТ ингибиру |