40 резекции. Перевязывали все подходящие к нему сосуды, рассекали брыжейку между лигатурами и производили удаление намеченного участка тонкой кишки. Энтероэнгероанастомоз накладывали «бок-в-бок» изоперистальтически двухрядным швом капроновыми нитями №1. Ушивали брыжейку в месте разреза и проверяли проходимость анастомоза. Разрез брюшной стенки ушивали послойно наглухо. В послеоперационном периоде на протяжении 5 суток животным вводили внутримышечно капамицин-сульфат из расчета 20 мг/кг в сутки. В это время также ограничивали питание, согласно рекомендациям, принятым в хирургической клинике. Продолжительность экспериментов составляла 3, 7, 15, 30 и 90 сут. Для всех видов исследования тонкая кишка забрана у голодных животных, выведенных из эксперимента с соблюдением «Правил проведения работ с использованием экспериментальных животных». В серии опытов с моделированием странгуляционной кишечной непроходимости (ущемление петли кишки с полным перерывом кровотока в ней и пассажа пищи) изучали приводящую петлю на протяжении 45 см, разделив ее на три участка: 1-15 см, 16-30 см, 31-45 см в проксимальном направлении от странгуляционной борозды. Такое деление вызвано необходимостью определения жизнеспособности структур тонкой кишки при разных сроках ущемления (3, 6, 12 и 24 ч). Отводящую петлю во всех случаях исследовали на протяжении 15 см. Для стандартизации забора материала придерживались следующей схемы. В пределах каждых 15 см первый 1см от зоны ущемления, участок между 15 и 16 см, 30 и 31 см фиксировали для гистологического исследования. Следующий 1 см между I и 2 см, 16 и 17 см, 31 и 32 см для гистохимического исследования сосудов оболочек тонкой кишки. В аналогичной последовательности забирали материал из отводящей петли в дистальном направлении от зоны ущемления. В сериях экспериментов с обтурационной кишечной непроходимостью и резекцией ущемленной петли кишки при заборе материала придерживались |
46 кишки. Энтероэнтероанастомоз накладывали «бок-в-бок» изоперистальтически двухрядным швом капроновыми нитями № 1. Ушивали брыжейку в месте разреза и проверяли проходимость анастомоза. Разрез брюшной стенки ушивали послойно наглухо. В послеоперационном периоде на протяжении 5 суток животным вводили внутримышечно канамицин-сульфат из расчета 20 мг/кг в сутки. В это время также ограничивали питание, согласно рекомендациям, принятым в хирургической клинике. Продолжительность экспериментов составляла 3, 7, 15, 30 и 90 сут. 2.4.1. Макро-микроскопические методики исследования Транскапиллярная инъекция. Для изучения микроваскуляризации оболочек стенок тонкой кишки и ворсинок слизистой оболочки использовали метод инъекции кровеносных сосудов органа. Применение различных масс для капиллярной инъекции в данной работе обусловлено различиями их свойств, позволяющих выявить особенности архитектоники внутриорганных сосудов в отдельных оболочках тонкой кишки и брыжейке. Применительно целям и задачам исследования употребляли тонкотертые краски: черную тушь, колларгол и парижскую синюю. Инъекцию производили через грудную аорту у животных, выведенных из эксперимента с соблюдением «Правил проведения работ с использованием экспериментальных животных». 1. Транскапиллярная инъекция 10% раствором колларгола. 10% водный раствор колларгола готовили за 1 сутки. Перед инъекцией его фильтровали через восемь слоев марли. Сосудистое русло предварительно промывали физиологическим раствором и 2% раствором цитрата натрия. Материал для исследования брали через сутки после инъекции в определенных согласно выбранной схеме забора материала участках кишки. После фиксации в 10% кислом формалине (2-10 сут) препараты промывали в течение получаса проточной холодной водой и расслаивали. Просветление препаратов 56 ней и пассажа пищи) изучали приводящую петлю на протяжении 45 см, разделив ее на три участка: 1-15 см, 16-30 см, 31-45 см в проксимальном направлении от странгуляционной борозды. Такое деление вызвано необходимостью определения жизнеспособности структур тонкой кишки при разных сроках ущемления (3, 6, 12 и 24 ч). Отводящую петлю во всех случаях исследовали на протяжении 15 см. Для стандартизации забора материала придерживались следующей схемы. В пределах каждых 15 см первый 1см от зоны ущемления, участок между 15 и 16 см, 30 и 31 см фиксировали для гистологического исследования. Следующий 1 см между 1 и 2 см, 16 и 17 см, 31 и 32 см для гистохимического исследования сосудов оболочек тонкой кишки. На участках между 2 и 7 см, 17 и 22 см, 32 и 37 см производилась морфометрия гемомикроциркуляторного русла оболочек стенки тонкой кишки. Участки 7-10 см, 22-25 см, и 37-40 см для импрегнации по Бильшовскому-Грос. Участки 10-11 см, 25-26 см, 40-41 см для заливки в целлоидин и исследование микрогемососудов кишечных ворсинок. Участки 11-12 см, 26-27 см, 41-42 см для обработки кусочков спиртом, заключения в парафин и приготовления срезов для окраски по Нисслю. В аналогичной последовательности забирали материал из отводящей петли в дистальном направлении от зоны ущемления. В сериях экспериментов с обтурационной кишечной непроходимостью и резекцией ущемленной петли кишки при заборе материала придерживались такой же схемы, начиная от места перевязки стенки кишки, а при резекции отступя 1 см от анастомоза. Таким образом, для изучения процессов репарации применен комплекс методик. Такое комплексное исследование позволит с морфофункциоиальных позиций подойти к объяснению ряда вопросов, возникающих при разработке критериев для выбора патогенетически обоснованного лечения больных с острой тонкокишечной непроходимостью в хирургической клинике. 58 ГЛАВА 3. ОСОБЕННОСТИ РЕПАРАТИВНЫХ ПРОЦЕССОВ В СТЕНКЕ ТОНКОЙ КИШКИ В ЗОНЕ ЭНТЕРОЭНТЕРОАНАСТОМОЗА И ЕЕ ГЕМОМЖРОЩ4РКУЛЯТОРНОГО РУСЛА У СОБАКИ ПОСЛЕ РЕЗЕКЦИИ ЕЕ НЕЖИЗНЕСПОСОБНОГО УЧАСТКА Динамика микроциркуляторных расстройств и ход репаративного процесса в зоне энтероэнтероанастомоза и на протяжении приводящей и отводящей петли после устранения различных видов острой тонкокишечной непроходимости изучены в разные сроки на 3, 7, 15, 30 и 90-е сутки после резекции петли тонкой кишки наложения энтероэнтероанасгомоза (табл. 1). Резекцию тонкой кишки выполняли через 3, 6, 12 и 24 ч после моделирования странгуляционной кишечной непроходимости, а также через 1, 2, 3 и 6 сутки после моделирования обтурационной кишечной непроходимости. Резекцию петли тонкой кишки вместе с 45 см приводящего и 45 см отводящего отделов при странгуляционной и обтурационной кишечной непроходимости производили после визуальной оценки жизнеспособности стенки кишки. Срединным разрезом вскрывали брюшинную полость и инфильтрировали корень брыжейки 0,25% раствором новокаина. Затем выводили в рану участок, подлежащий резекции, и намечали границы резекции. Перевязывали все подходящие к нему сосуды, рассекали брыжейку между лигатурами и производили удаление намеченного участка тонкой кишки. Энтероэнтероанастомоз накладывали «бок-в-бок» изоперистальтически двухрядным швом капроновыми нитями № 1. Ушивали брыжейку в месте разреза и проверяли проходимость анастомоза. Разрез брюшной стенки ушивали послойно наглухо. В послеоперационном периоде на протяжении 5 суток животным вводили внутримышечно канамицин-сульфат из расчета 20 мг/кг в сутки. В это время также ограничивали питание, согласно рекомендациям, принятым в хирургической клинике. Для всех видов исследования тонкая кишка забрана у голодных животных, выведенных из эксперимента с соблюдением с соблюдением «Правил проведения работ с использованием экспериментальных животных». |