41 такой же схемы, начиная от места перевязки стенки кишки, а при резекции отступя 1 см от анастомоза. 2.4.1. Макромикроскопические методики исследования Транскапиллярная инъекция. Для изучения микроваскуляризации оболочек стенок тонкой кишки и ворсинок слизистой оболочки использовали метод инъекции кровеносных сосудов органа. Инъекцию производили через грудную аорту у животных, выведенных из эксперимента с соблюдением «Правил проведения работ с использованием экспериментальных животных». 1. Транскапиллярная инъекция 10% раствором колларгола. 10% водный раствор колларгола готовили за 1 сутки. Перед инъекцией его фильтровали через восемь слоев марли. Сосудистое русло предварительно промывали физиологическим раствором и 2% раствором цитрата натрия. Материал для исследования брали через сутки после инъекции в определенных согласно выбранной схеме забора материала участках кишки. После фиксации в 10% кислом формалине (2-10 сут) препараты промывали в течение получаса проточной холодной водой и расслаивали. Просветление препаратов проводили в глицерине возрастающей концентрации 25-50-75-100%. Микрофотографирование просветленных препаратов производили при помощи лупы «МБС-2» и фотоаппарата «Зенит». 2.4.2. Морфометрия. Для морфометрического исследования применяли анализатор изображения с использованием программы ЬЫса (2\Ут, включающий бинокулярный микроскоп ИМЫЗ с видеоприставкой Ьеюа (производство |
46 кишки. Энтероэнтероанастомоз накладывали «бок-в-бок» изоперистальтически двухрядным швом капроновыми нитями № 1. Ушивали брыжейку в месте разреза и проверяли проходимость анастомоза. Разрез брюшной стенки ушивали послойно наглухо. В послеоперационном периоде на протяжении 5 суток животным вводили внутримышечно канамицин-сульфат из расчета 20 мг/кг в сутки. В это время также ограничивали питание, согласно рекомендациям, принятым в хирургической клинике. Продолжительность экспериментов составляла 3, 7, 15, 30 и 90 сут. 2.4.1. Макро-микроскопические методики исследования Транскапиллярная инъекция. Для изучения микроваскуляризации оболочек стенок тонкой кишки и ворсинок слизистой оболочки использовали метод инъекции кровеносных сосудов органа. Применение различных масс для капиллярной инъекции в данной работе обусловлено различиями их свойств, позволяющих выявить особенности архитектоники внутриорганных сосудов в отдельных оболочках тонкой кишки и брыжейке. Применительно целям и задачам исследования употребляли тонкотертые краски: черную тушь, колларгол и парижскую синюю. Инъекцию производили через грудную аорту у животных, выведенных из эксперимента с соблюдением «Правил проведения работ с использованием экспериментальных животных». 1. Транскапиллярная инъекция 10% раствором колларгола. 10% водный раствор колларгола готовили за 1 сутки. Перед инъекцией его фильтровали через восемь слоев марли. Сосудистое русло предварительно промывали физиологическим раствором и 2% раствором цитрата натрия. Материал для исследования брали через сутки после инъекции в определенных согласно выбранной схеме забора материала участках кишки. После фиксации в 10% кислом формалине (2-10 сут) препараты промывали в течение получаса проточной холодной водой и расслаивали. Просветление препаратов 47 проводили в глицерине возрастающей концентрации 25-50-75-100%. Микрофотографирование просветленных препаратов производили при помощи лупы «МБС-2» и фотоаппарата «Зенит». 2. Транскапиллярная инъекция взвесью парижской синей. Взвесь парижской синей, готовили на эфире и хлороформе в пропорциях 50,0 граммов краски, 50,0 эфира, 150,0 граммов хлороформа. Инъекция выполнялась под давлением 110-120 мм. рт. ст. Для оттока крови перерезали нижнюю полую вену в месте впадения ее в предсердие. Сосудистое русло предварительно промывали физиологическим раствором и 2% раствором цитрата натрия. После инъекции извлекали тонкую кишку из брюшной полости, промывали проточной холодной водой и, заполнив 12% нейтральным формалином, помещали в такой же фиксатор, в 25-30 раз превышающий объем ткани. Фиксатор заменяли свежим через 4 и 24 ч, 3, 7 и 15 сут. 2.4.2. Морфометрия и методики статистической обработки Внутренний диаметр сосудов гемомикроциркуляторного русла в оболочках тонкой кишки измеряли на препаратах, инъецированных 10% раствором колларгола. Морфометрию капиллярного русла проводили с предварительным определением цены деления измерительной линейки сеткиквадрата и окуляр-микрометра по стандартной шкале объект-микрометра с ценой деления 0,01 мм (ГОСТ-7513-55 № 625306). На препаратах одной серии для каждого звена микроциркуляторного русла производили не менее 30-ти измерений. В процессе вариационностатистической обработки подсчитывали среднее арифметическое значение диаметра микрососудов (х), ошибку среднего арифметического (шХ), коэффициент вариации (Ух) и среднее квадратическое отклонение (а). На этих же препаратах в каждой из оболочек стенок кишки на установке |