|
42 Германия). Измеряли внутренний диаметр сосудов гемомикроциркуляторного русла в оболочках тонкой кишки в гистологических препаратах, окрашенных гематоксилином и эозином и по Ван-Гизон. Па препаратах одной серии для каждого звена микроциркуляторного русла производили не менее 30-ти измерений. В процессе вариационно-статистической обработки подсчитывали среднее арифметическое значение диаметра микрососудов (х), ошибку среднего арифметического (тХ), коэффициент вариации (Ух) и среднее квадратическое отклонение (а). 2.5. Гистологические методики исследования Для изучения микроциркуляторного русла в норме сразу же после смерти животного иссекали из начального, среднего и конечного отделов тощей и подвздошной кишки кусочки размером 1,0 х 1,0 см. У экспериментальных животных и животных контрольной фупны аналогичные кусочки иссекались в участках, согласно выбранной схеме забора материала. Кусочки фиксировали в 12% нейтральном формалине или смеси Карнуа, и после соответствующей проводки заливали в парафин. Из материала, залитого в парафин, готовили срезы толщиной 7-10 мкм, которые окрашивали гематоксилином-эозином и по Ван-Гизон. С целью более полной характеристики преобразований стенок сосудов различного порядка ветвления на гистологических срезах измерялись: толщина слоев стенки сосуда, количество и средний размер ядер в эндотел и оцитах (на основе определения их длинного и короткого поперечного размера). Кроме того, определялось ядерно-цитоплазматическое отношение, изучалось соотношение толщины эндотелия, мышечной и соединительнотканной оболочек стенок сосудов. При кариометрических исследованиях объем выборки на срезе составлял, согласно общепринятому мнению, не менее 100 клеток (3, 4, 5). |
47 проводили в глицерине возрастающей концентрации 25-50-75-100%. Микрофотографирование просветленных препаратов производили при помощи лупы «МБС-2» и фотоаппарата «Зенит». 2. Транскапиллярная инъекция взвесью парижской синей. Взвесь парижской синей, готовили на эфире и хлороформе в пропорциях 50,0 граммов краски, 50,0 эфира, 150,0 граммов хлороформа. Инъекция выполнялась под давлением 110-120 мм. рт. ст. Для оттока крови перерезали нижнюю полую вену в месте впадения ее в предсердие. Сосудистое русло предварительно промывали физиологическим раствором и 2% раствором цитрата натрия. После инъекции извлекали тонкую кишку из брюшной полости, промывали проточной холодной водой и, заполнив 12% нейтральным формалином, помещали в такой же фиксатор, в 25-30 раз превышающий объем ткани. Фиксатор заменяли свежим через 4 и 24 ч, 3, 7 и 15 сут. 2.4.2. Морфометрия и методики статистической обработки Внутренний диаметр сосудов гемомикроциркуляторного русла в оболочках тонкой кишки измеряли на препаратах, инъецированных 10% раствором колларгола. Морфометрию капиллярного русла проводили с предварительным определением цены деления измерительной линейки сеткиквадрата и окуляр-микрометра по стандартной шкале объект-микрометра с ценой деления 0,01 мм (ГОСТ-7513-55 № 625306). На препаратах одной серии для каждого звена микроциркуляторного русла производили не менее 30-ти измерений. В процессе вариационностатистической обработки подсчитывали среднее арифметическое значение диаметра микрососудов (х), ошибку среднего арифметического (шХ), коэффициент вариации (Ух) и среднее квадратическое отклонение (а). На этих же препаратах в каждой из оболочек стенок кишки на установке 51 2.5. Гистологические методики исследования Для изучения микроциркуляторного русла в норме сразу же после смерти животного иссекали из начального, среднего и конечного отделов тощей и подвздошной кишки кусочки размером 1,0 х 1,0 см. У экспериментальных животных и животных контрольной группы аналогичные кусочки иссекались в участках, согласно выбранной схеме забора материала. Кусочки фиксировали в 12% нейтральном формалине или смеси Карнуа, и после соответствующей проводки заливали в парафин. После формалиновой фиксации материал резали на замораживающем микротоме. Полученные срезы толщиной 90-120 мкм импрегнировали азотнокислым серебром по Бильшовскому-Грос. Из материала, залитого в парафин, готовили срезы толщиной 7-10 мкм, которые окрашивали гематоксилином-эозином, орсеином, по Ван-Гизон, по Нисслю и по Маллори. С целью более полной характеристики преобразований стенок сосудов различного порядка ветвления на гистологических срезах измерялись: толщина слоев стенки сосуда, количество и средний размер ядер в эндотелиоцитах (на основе определения их длинного и короткого поперечного размера). Кроме того, определялось ядерно-цитоплазматическое отношение, изучалось соотношение толщины эндотелия, мышечной и соединительнотканной оболочек стенок сосудов, индекс Керногана показатель конусности (Козлов В.И., Банин В.В., 1976), коэффициент извилистости (Белкин В.Ш., Дорофеев А.А., Машков В.С., Усманов М.У., 1980). з а где 8 толщина стенки сосуда; а диаметр просвета сосуда; При кариометрических исследованиях объем выборки на срезе составлял, согласно общепринятому мнению, не менее 100 клеток (Автандилов Г.Г., 1973; Ташкэ К., 1980). |