|
43 2.6. Гистохимические методики исследования Применение гистохимических методик продиктовано необходимостью изучения состояния обменных процессов в стенках сосудов после моделирования кишечной непроходимости и резекции нежизнеспособною участка тонкой кишки в различные сроки. Для оценки уровня метаболизма в эндотелиоцитах капилляров в условиях новообразования сосудов производили определение содержания суммарных нуклеиновых кислот по Эйнарсону. Помимо информации о нуклеопротеидном обмене в клетке, реакция с галлоцианин-хромовыми квасцами давала возможность оценить морфологические изменения в сосудах гемомикроциркуляторного русла. При работе применялся 0,15% раствор галлоцианина на 5% растворе хромовых квасцов (раствор кипятили в течении 5 минут, охлаждали и фильтр, фильтрат разбавляли дистиллированной водой до 100 мл) ГХК. Фиксированный в 10% формалине, спирте-формалине, абсолютном спирте или жидкости Карнуа материал заливали в парафин. Срезы после депарафинирования по обычной методике переносили в дистиллированную воду на 5-10 минут и раствор ГХК на 12-24 ч. После промывки водопроводной водой и дистиллированной водой (время значения не имеет) срезы просушивали фильтровальной бумагой, просветляли в 2-3 порциях ксилола (без обработки спиртом), заключали в бальзам или полистирол. Результаты реакций оценивали количественно с помощью количественной цитоспектрофотометрии. 2.7. Количественная оценка результатов цитохимических реакций Количественную оценку результатов цитохимических реакций проводили посредством точечной фотометрии эндотелиоцитов. Выбор точек измерения основывался на статистических требованиях достоверной достаточности данных с целью оценить гистохимические изменения в стенках кишки и |
52 2.6. Гистохимические методики исследования Применение гистохимических методик продиктовано необходимостью изучения состояния обменных процессов в стенках сосудов после моделирования кишечной непроходимости и резекции нежизнеспособного участка тонкой кишки в различные сроки. Для оценки уровня метаболизма в эндотелиоцитах капилляров в условиях новообразования сосудов производили определение содержания суммарных нуклеиновых кислот по Эйнарсону. Помимо информации о нуклеопротеидном обмене в клетке, реакция с галлоцианин-хромовыми квасцами давала возможность оценить морфологические изменения в сосудах гемомикроциркуляторного русла. При работе применялся 0,15% раствор галлоцианина на 5% растворе хромовых квасцов (раствор кипятили в течении 5 минут, охлаждали и фильтр, фильтрат разбавляли дистиллированной водой до 100 мл ) ГХК. Фиксированный в 10% формалине, спирте-формалине, абсолютном спирте или жидкости Карнуа материал заливали в парафин. Срезы после депарафинирования по обычной методике переносили в дистиллированную воду на 5-10 минут и раствор ГХК на 12-24 ч. После промывки водопроводной водой и дистиллированной водой (время значения не имеет) срезы просушивали фильтровальной бумагой, просветляли в 2-3 порциях ксилола (без обработки спиртом), заключали в бальзам или полистирол. Результаты реакций оценивали количественно с помощью количественной цитоспектрофотометрии. 2.7. Количественная оценка результатов цитохимических реакций Количественную оценку результатов цитохимических реакций проводили посредством точечной фотометрии эндотслиоцитов. Выбор точек измерения основывался на статистических требованиях достоверной достаточности данных с целью оценить гистохимические изменения в стенках кишки и сосудах. Измерение выполняли на фотомикроскопе «Оптон-1П» с приставкой |