|
33 Антиростовые факторы, могут блокировать пролиферацию по двум различным механизмам: либо временной остановкой в С1 фазе либо выходом из клеточного цикла в СО фазу сразу же после митоза, которая обычно ассоциируется с дифференцировкой клеток. Пролиферативная активность опухолевого клона зависит также от необратимого перехода клеток в стадию дифференцировки. Молекулярные механизмы, определяющие выход клеток из клеточного цикла в стадию покоя, до конца еще не известны [1]. По данным литературы, одним из неблагоприятных факторов прогноза в группе пациентов с НМРЛ, является анеуплоидия опухолевых клеток [63, 82], определяемая методом цитофлуорометрии. Популяция с одним модальным пиком, расположенным в области диплоидных стандартов (клетки нормальных тканей, лимфоциты, гранулоциты), считается диплоидной опухолью, при наличии двух четких пиков на ДНК гистограмме анеуплоидной [151, 153]. В последнее время ряд авторов указывают на прогностическое значение определения плоидности, пролиферативной активности и клеточного цикла опухоли у больных раком легкого. Однако, эти сведения немногочисленны и зачастую противоречивы [3, 7, 56, 61, 123, 133, 171]. Так по данным Б.Е. Полоцкого 1995, соотношение анеуплоидных и диплоидных опухолей не зависит от распространенности, гистологической принадлежности и дифференцировки клеток новообразования. При отсутствии регионарных метастазов диплоидные опухоли менее агрессивны по сравнению с анеуплоидными аналогами. Содержание ДНК в этих случаях следует рассматривать как независимый прогностический фактор. При мстастазировании во внутригрудпые лимфатические узлы плоидность клеток новообразования теряет свое прогностическое значение [37]. В исследовании 1п$1Пи1е о Г РаЙю1о1дса1 Апаюшу, Ш!Уег5ки1е оГ Ште (Италия) доказано, что индекс ДНК и плоидность коррелируют с инфильтрацией плевры, размерами первичного очага, гистологическим типом и пали |
особенностей, а, следовательно, более точного прогнозирования результатов хирургического лечения. В настоящее время наибольшее развитие получили два исследовательских метода этого направления: морфометрия (’ила&е апа1уз15) и проточная цитометрия [5, 6]. Благодаря внедрению метода лазерной ДНК-проточной цитофлуорометрии появилась реальная возможность определять плоидность клеток опухоли, соотношение клеток в различных фазах клеточного цикла, исключая субъективизм исследования, и, следовательно, объективно выявлять особенности пролиферации и аномальное содержание ДНК [177,180]. Нарушения кариотипа в злокачественных опухолях варьируют в широких пределах, и эти изменения касаются как числа хромосом, так и их структурных трансформаций [146]. Количество ДНК в ядре пропорционально общему содержанию хромосомного материала. В постмитотических нормальных соматических клетках человека содержится диплоидный набор хромосом, который равняется 46 хромосомам и соответствует 01/0 фазе клеточного цикла; в 8 фазе клеточного цикла это значение равняется Зс, а в 02+М фазе 4с [64]. С помощью ДНК-проточной цитометрии с высокой достоверностью можно определить степень плоидности клеток опухоли с одновременной оценкой их пропорции в различных фазах клеточного цикла (0.0. Ьаегит и соавт., 1981) [126]. При исследовании методом проточной цитомстрии могут возникать трудности при малом количестве опухолевых клеток в изучаемом материале [74]. При достаточном их содержании на гистограммах четко определяется их доминирующая стволовая линия, которая имеет диагностическое значение [92, 95, 177]. Популяция с одним модальным пиком, расположенным в области диплоидных стандартов (клетки нормальных тканей, лимфоциты, гранулоциты), считается диплоидной опухолью, при наличии 46 двух четких пиков на ДНК гистограмме анеуплоидной [54, 55, 177, 178]. В последнее время ряд авторов указывают на прогностическое значение определения плоидности, пролиферативной активности и клеточного цикла опухоли у больных раком легкого. Однако, эти сведения немногочисленны и зачастую противоречивы [5, 33, 59, 66, 130, 151, 199]. Так по данным Б.Е. Полоцкого 1995, соотношение анеуплоидных и диплоидных опухолей не зависит от распространенности, гистологической принадлежности и дифференцировки клеток новообразования. При отсутствии регионарных метастазов диплоидные опухоли менее агрессивны по сравнению с анеуплоидными аналогами. Содержание ДНК в этих случаях следует рассматривать как независимый прогностический фактор. При метастазировании во внутригрудные лимфатические узлы плоидность клеток новообразования теряет свое прогностическое значение [33]. В исследовании 1п5ЙШ1е оГ Ра(Ьо1о§1са1 АпаЮту, 11шуег$ки1е оГШте (Италия) доказано, что индекс ДНК и плоидность коррелируют с инфильтрацией плевры, размерами первичного очага, гистологическим типом и наличием некроза в опухоли. Инфильтрация плевры и распространенность ТЗ отмечалась чаще при выявлении анеуплондности и гиперанеуплоидности (ДНК>2,5) опухоли. Плоскоклеточный рак по данным авторов [75] оказался преимущественно анеуплоидным (ИДНК в пределах митотического цикла). По данным П5ис!а К., 8ако У., 8акигас1а А. е1 а1. 1994г. плоидность является независимым фактором прогноза у больных первичным раком легкого, кроме того обнаружено достоверное прогностическое значение времени удвоения опухоли, стажа курильщика сигарет, размеров первичного очага, метастазов в лимфатических узлах, содержания аргирофильных организующих зон ядрышек (АОЗЯ)[196]. 47 |