Проверяемый текст
Лактионов Константин Константинович. Плоскоклеточный рак легкого (значение клинико-морфологических и молекулярно-генетических характеристик опухоли в прогнозировании результатов хирургического лечения) (Диссертация 2004)
[стр. 54]

строил ДНК гистограмму.
В каждом образце анализировались не менее 25000 клеток при строгом цитологическом контроле.
С помощью встроенной в прибор ЭВМ полученные данные записывались на дискеты и анализировались соответствующими компьютерными программами:
Зу51ет-ИгЬ (уегзюп 3,0 СоиКег, США) и №пЫ& и МиШСус1е (РЬоешх Р!о\у 8уз1ст$, США).
Данное программное обеспечение позволяет отделить целые клетки опухоли от разрушенных, убрать фрагменты опухолевой ткани, конгломераты клеток опухоли и автоматически рассчитать индекс ДНК (И-ДНК), процент аиеуплоидных клеток в опухоли, их число в 00/1, 8, и 02+М фазах клеточного цикла, при цитологическом контроле с помощью методики Су1о$рш (ЗЬашЗоп, Великобритания).
В полученной гистограмме процент клеточных ядер с различным содержанием ДНК вычислялся по отношению к общему числу исследованных клеток.
Коэффициент вариации был меньше 10%.
В качестве диплоидного стандарта использовали лимфоциты человека.
Для характеристики степени
анеуплоидии использовали И-ДНК, который характеризует соотношение интенсивности флуоресценции пика анеуплоидных клеток к пику диплоидных.
И-ДНК диплоидных клеток соответствует 1,0; И-ДНК тетраплоидных был равен 2,0;
анеуплоидиых более или менее 1,0.
2.2.3.
Математический
обработка материала При оценке отдаленных результатов хирургического лечения исследовалась кумулятивная выживаемость по методу Кар1ап-Ме1ег с использованием компьютерной программы 31айз11с 5.5.
Оценка достоверности различий в выборках проводилась по критерию Фишера.

54
[стр. 60]

2.2.2.
Методика определения содержания ДНК методом лазерной проточной цитофлуорометрии при плоскоклеточном раке легкого При использовании материала из парафиновых блоков на микротоме изготавливалось по 3-5 среза по 50 мкм с каждого блока.
Срезы депарафинировали в трех порциях смеси ксилола с гексаном в пропорции 1:1.
Затем осуществляли регидратацию в спиртах нисходящей концентрации.
После регидратации тканевые фрагменты дезагрегировали с помощью 0,5% раствора пепсина (активность 2500 Ед/мг) при рН 1,5 и температуре 37е в течение 45 минут при постоянном встряхивании.
После центрифугирования осадок ресуспензировали в 3 мл ТРИС-буфера рН 7,4 с 3600 ипйз/мл РНКазы ($1§та, США).
Перед исследованием отсасывали надосадочную жидкость, отбирали 1 каплю осадка (остальную часть заливали 70 % этанолом и хранили для повторных исследований) и окрашивали специфичным для ДНК красителем: РгорЫшт юсйбе (50 мг/л, ТРИС-буфер рН 7,4 «$1&та») и фильтровали через 70 мкм нейлоновый фильтр.
Образцы исследовались на проточном анализаторе ЕР1СЗ-ХЬ (Соийег-Вескшеп, США) с аргоновым лазером.
Флуоресценцию окрашенных ядер, в голубой области спектра (88 нм) улавливали фотоумножители анализатора, преобразуя ее затем в электрические сигналы, на основании которых прибор строил ДНК гистограмму.
В каждом образце анализировались не менее 25000 клеток при строгом цитологическом контроле.
С помощью встроенной в прибор ЭВМ полученные данные записывались на дискеты и анализировались соответствующими компьютерными программами:
Зуз1ет-И1Ь (уегзюп 3,0 Соийег, США) и \УтЫ$1: и МиШСус1е (РЬоетх Р1оуу 8у$1ешз, США).
Данное програмное обеспечение позволяет отделить целые клетки опухоли от разрушенных, убрать фрагменты опухолевой ткани, конгломераты клеток опухоли и автоматически 60

[стр.,61]

рассчитать индекс ДНК (И-ДНК), процент анеуплоидных клеток в опухоли, их число в 00/1, 8, и 02+М фазах клеточного цикла, при цитологическом контроле с помощью методики СуЮзрт (8Ьапс1оп, Великобритания).
В полученной гистограмме процент клеточных ядер с различным содержанием ДНК вычислялся по отношению к общему числу исследованных клеток.
Коэффициент вариации был меньше 10%.
В качестве диплоидного стандарта использовали лимфоциты человека.
Для характеристики степени
анеуплоидни использовали ИДНК, который характеризует соотношение интенсивности флуоресценции пика анеуплоидных клеток к пику диплоидных.
И-ДНК диплоидных клеток соответствует 1,0; И-ДНК тетраплоидных был равен 2,0;
анеуплоидных-более или менее 1,0.
2.2.3.
Математический
аппарат факторного анализа системы «ФАКТОР» При анализе клинического материала была использована новая технология компьютерной обработки информации система регрессионно-факторного анализа многопараметрических объектов, разработанная главным специалистом по системам научного анализа Колосовым Е.А.
и зарекомендовавшая себя при решении научных задач прогноза и оптимизации лечения в онкологии у взрослых и детей в ряде предыдущих исследований [31, 34, 35, 43].
Метод получил положительную оценку специалистов по компьютерной обработке данных в научно-практической работе на научной сессии МИФИ 2001 года с международным участием, и подтверждена возможность решения с его помощью научно-практических задач оценки эффективности, точного прогнозирования и оптимального 61

[стр.,66]

сти мы приводим статистически значимые зависимости, полученные в результате обработки данных стандартными статистическими методами.
При оценке отдаленных результатов хирургического лечения исследовалась кумулятивная выживаемость по методу Кар1ап-Ме1ег с использованием компьютерной программы
3(а(1$11С 5.5.
Оценка достоверности различий в выборках проводилась по критерию Фишера.

66

[Back]