|
52 дефибринизированной нагреванием в течение 10 мин при 56*С. Верификация теста осуществлялась при исследовании донорской плазмы в смеси с абсорбированной, дефибринизированной плазмой. Все объемы плазмы, каолинового реактива и раствора СаС12 (0,25М) использовались в одинаковых соотношениях по 0,1 мл при температуре 37*С. О наличии ВА свидетельствовало последовательное удлинение параметров АВР в смеси исследуемой и дефибринизированной плазмы на 10-15% и более по отношению к аналогичным показателям в донорской плазме. При удлинении времени образования сгустка более, чем на 10 секунд, проба считалась слабо положительной, более 20 секунд положительной, более 25 секунд резко положительной. В ходе исследования использовались все 4 приведенные выше коагуляционные тесты. Интерпретация результатов проводилась с учетом всех 4 показателей. Отрицательным считался результат, если в 3 или 4 исследуемых пробах не отмечалось удлинения времени свертывания. Учитывая высокий риск нарушения свертывающей системы крови при неразвивающейся беременности, всем пациенткам основной группы проведен анализ гемостазиограмм, который включал определение следующих параметров: 1. Показатели коагуляционного гемостаза: концентрация фибриногена гравиметрическим методом по Р.А.Рутберг, протромбинового индекса но Квику (характеристика 2.5.7.10 факторов гемостаза), исследование основных параметров тромбоэластограммы (времени реакции от начала коагуляции до образования нитей фибрина; времени от образования нитей фибрина до формирования сгустка определенной плотности; максимальная амплитуда, характеризующая свойства фибринового сгустка). |
Волчаночный коагулянт определяли по удлинению времени свертывания при исследовании бестромбоцитарной плазмы в следующих тестах: -активированное время рекальцификации плазмы с каолином; -метод D.E.P. Austen, I.L.Rhymes в модификации Л.З.Прудниковой, Т.В.Сайковской (1989); тест смешивания с плазмой донора в соотношении l:l(m ixt-test); -время свертывания с ядом гадюки Рассела. Серийное определение активированного времени рекальцификации (АВР), характеризует суммарную активность факторов внутреннего звена гемостаза [2, 5, 7, 9, 10, И , 12], в присутствии каолина (5мг/мл). Принцип метода состоит в удлинении каолинового времени рекальцификации плазмы крови под действием ВА, который не адсорбируется гидроокисью алюминия и выдерживает нагревание при 56°С. Исследования проводилось в системах: интактная плазма больной в смеси с плазмой больной, абсорбированной раствором А1(ОН)3 и дефибринизированной нагреванием в течение 10 мин при 56*С. Верификация теста осуществлялась при исследовании донорской плазмы в смеси с абсорбированной, дефибринизированной плазмой. Все объемы плазмы, каолинового реактива и раствора СаС12 (0,25М) использовались в одинаковых соотношениях по 0,1 мл при температуре 37*С. О наличии ВА свидетельствовало последовательное удлинение параметров АВР в смеси исследуемой и дефибринизированной плазмы на 10-15% и более по отношению к аналогичным показателям в донорской плазме. При удлинении времени образования сгустка более, чем на 10 секунд, проба считалась слабо положительной, более 20 секунд —положительной, более 25 секунд —резко положительной. В ходе исследования использовались все 4 приведенные выше коагуляционные тесты. Интерпретация результатов проводилась с учетом всех 4 показателей. Отрицательным считался результат, если в 3 или 4 исследуемых пробах не отмечалось удлинения времени свертывания. 48 Учитывая высокий риск нарушения свертывающей системы крови при неразвивающейся беременности, всем пациенткам основной группы проведен анализ гемостазиограмм, который включал определение следующих параметров: 1. Показатели коагуляционного гемостаза: концентрация фибриногена гравиметрическим методом по Р.А.Рутберг, протромбинового индекса по Квику (характеристика 2.5.7.10 факторов гемостаза), исследование основных параметров тромбоэластограммы (времени реакции от начала коагуляции до образования нитей фибрина; времени от образования нитей фибрина до формирования сгустка определенной плотности; максимальная амплитуда, характеризующая свойства фибринового сгустка). 2. Показатели внутрисосудистого тромбообразования: растворимых комплексов мономеров фибрина с использованием протамисульфатного теста по S.Nieviarovski, V. Gurivich (1971) и этанолового теста по H.I. Godai, U. Abildgaard (1966), свидетельствующих о циркуляции активного фибрина в крови. 3. Показатели сосудисто-тромбоцитарного гемостаза: количество тромбоцитов периферической крови с помощью счетчика «Trombocaunter» (Франция), агрегация тромбоцитов, определяемая на агрегометре «Cronolog» (СШ А). Всем пациенткам с неразвивающейся беременностью проводилось также определение антител к хорионическому гонадотропину человека (аХГЧ) методом иммуноферментного анализа (ИФА) с применением высокоочищенного препарата ХГЧ («Sigma») и мышиных моноклональных антител. Использовали пероксидазные конъюгаты против иммуноглобулинов человека классов IgM и IgG (Институт вирусных препаратов РАМН). 49 |