|
44 ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 2.1. Экспериментальное исследование течения спаечного процесса в брюшной полости у крыс и возможность его модуляции Эксперимент выполнялся на 70 беспородных крысах (начальная масса 150г). В первой части исследования была создана экспериментальная модель спаечного процесса в брюшной полости. С этой целью проводилась операция под кислородно-эфирной смесью с местным обезболиванием линии разреза 0,25% раствором новокаина. В асептических условия после выполнения срединной лапаротомии производили 71есерозирование толстой кишки и прилежащей части брюшины передней брюшной стенки марлевым тупфером, смоченным 75° этиловым спиртом. Затем передняя брюшная стенка ушивалась отдельными узловыми швами. Перед операцией и в послеоперационном периоде в опытной группе вводили препарат Вобэнзим в дозе: 1 таблетка в сутки. Перед введением таблетку измельчали в ступке до порошкообразного состояния, а затем растворяли в 2,0 миллилитрах 0,9% раствора хлорида натрия. Полученную взвесь вводили шприцом при помощи металлического зонда в желудок за 30 минут до приема пищи 2 раза в сутки, на протяжении 21 суток. В контрольной группе всем животным через зонд вводили физиологический раствор 2 раза в сутки, на протяжении 21 суток. Животных выводились из эксперимента на 1-е, 3, 5, 10, 21, 28, 90-е сутки после начала эксперимента. Все животные подвергались вскрытию. Во время секции производился тщательный осмотр париетальной и висцеральной брюшины, фотографирование и забор ее кусочков для гистологического исследования. Полученные образцы фиксировались 10% раствором нейтрального формалина и заливались в парафин. Далее готовили срезы тол |
75 ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 2.1. Экспериментальное исследование действия гидролитических ферментов на течение раневого процесса Для изучения действия псшиферментного препарата Вобэнзим на течение раневого процесса был проведен эксперимент на 70 крысах. Под кислородно-эфирной смесью с местным обезболиванием линии разреза 0,25% раствором новокаина в асептических условиях выполнялся разрез через все слои передней брюшной стенки длиной до 3 см. Восстановление целостности тканей проводилось с помощью шелка. Перед выполнением операции и в послеоперационном периоде в опытной группе осуществляли зондовое введение полиферментного препарата Вобэнзим в дозе 100 мг/кг в сутки. Перед введением драже Вобэнзима измельчали и растворяли в 2,0 миллилитрах 0,9% раствора хлорида натрия. Полученную взвесь вводили шприцом через металлический зонд в желудок за 30 минут до приема пищи 2 раза в сутки, на протяжении 21 суток. В контрольной группе через зонд вводили физиологический раствор. Животных выводили из эксперимента на 1-е, 3, 5, 10, 21 и 90-е сутки после начала эксперимента с последующим тщательным осмотром и оценкой состояния послеоперационной раны/рубца, брюшной полости с фотографированием и забором передней брюшной стенки, желудка, толстой и тонкой кишки для гистологического исследования. Полученные образцы фиксировали 10% раствором нейтрального формалина и заливали в парафин. Далее готовили срезы толщиной 8-10 микрон, которые окрашивали гематоксилином и эозином, пикрофуксином по Ван Гизону. Полученные препараты исследовали с помощью светового микроскопа. 76 Статистическая оценка эффективности полиферментной терапии осуществлялась с помощью критерия х2> последний рассчитывался по следующей формуле [85, 204]: X2 = (ас1-Ьс)2 х п / (а+Ъ)х(с+д)х(а+с)х(Ъ+с1), где п = а+Ь+с+ё Для определения эффективности воздействия препарата Вобэнзим на спаечный и раневой процесс принималась нулевая гипотеза полиферментный препарат не оказывал влияния на течение этих процессов, т.е. фактически наблюдаемые различия в частоте хороших и плохих результатов были случайны и при гораздо большем числе наблюдений различий не будет [222]. О наличии связи между возникновением события и изучаемым признаком судили по табличным значениям х2распределения, при х2>3,84 (р<0,05) вероятность составляла 95% и при х2>6,63 (р<0,01) вероятность 99% [14, 259]. Полученные в исследованиях данные давали возможность подтвердить или отвергнуть нулевую гипотезу об эффективности лечения. 2.2. Течение спаечного процесса в брюшной полости у крыс и исследование возможности его модуляции Эксперимент выполнялся на 70 беспородных крысах (начальная масса 150г). В первой части исследования была создана экспериментальная модель спаечного процесса в брюшной полости. С этой целью проводилась операция под кислородно-эфирной смесью с местным обезболиванием линии разреза 0,25% раствором новокаина. В асептических условия после выполнения срединной лапаротомии производили десерозирование толстой кишки и прилежащей части брюшины передней брюшной стенки марлевым 77 тупфером, смоченным 75° этиловым спиртом. Затем передняя брюшная стенка ушивалась отдельными узловыми швами. Перед операцией и в послеоперационном периоде в опытной группе вводили препарат Вобэнзим в дозе: 1 таблетка в сутки. Перед введением таблетку измельчали в ступке до порошкообразного состояния, а затем растворяли в 2,0 миллилитрах 0,9% раствора хлорида натрия. Полученную взвесь вводили шприцом при помощи металлического зонда в желудок за 30 минут до приема пищи 2 раза в сутки, на протяжении 21 суток. В контрольной группе всем животным через зонд вводили физиологический раствор 2 раза в сутки, на протяжении 21 суток. Животных выводились из эксперимента на 1-е, 3, 5,10,21,28, 90-е сутки после начала эксперимента. Все животные подвергались вскрытию. Во время секции производился тщательный осмотр париетальной и висцеральной брюшины, фотографирование и забор ее кусочков для гистологического исследования. Полученные образцы фиксировались 10% раствором нейтрального формалина и заливались в парафин. Далее готовили срезы толщиной 8-10 микрон, окрашивали гематоксилином и эозином, пикрофуксином по Ван Гизону. Кроме гистологического исследования осуществляли цитологическое исследование экссудата или смыва, полученного из брюшной полости до начала эксперимента и после его окончания. Цитологические препараты окрашивали по Гимзе-Романовскому. Препараты исследовали с помощью светового микроскопа и описывали согласно указанным срокам. 2.3. Применение ферментной терапии в комплексном лечении и реабилитации в абдоминальной хирургии Клиническая часть работы проводилась на базе хирургических отделений Детской краевой клинической больницы г. Ставрополя в период с 1998 по 2003гг. Под нашим наблюдением находилось 282 ребенка в возрас |