хемилюминесценции клеток. Концентрацию иммуноглобулинов IgG, IgA, IgM определяли турбодиметрическим методом с помощью наборов фирмы Human, иммуноглобулина IgE иммуноферментным методом с помощью наборов «Диа Плюс», циркулирующие иммунные комплексы турбодиметрическим методом по скорости образования агрегатов в 3% и 4% полиэтиленгликоле. При описании изменений иммунного статуса приводится процент случаев в анализируемой группе больных со значением показателя выше верхней границы нормы (ВН) или ниже нижней границы нормы (НН). Н.З. Методы статистической обработки результатов исследования. Статистическую обработку данных проводили с использованием пакета программ иStatistica” (“StatSoft”, США). Для сравнения параметров с нормальным распределением использовался парный t-тест для независимых выборок. Результаты представлены в виде M±SD. Для параметров, распределение которых отличалось от нормального, при сравнении групп использовали критерий Манн-Уитни соответственно парному t-критерию, результаты представлены в виде медианы с интерквартильным размахом (ИР, 25-й 75-й процентиль). Корреляционный анализ проводился по методу Спирмена. Анализ качественных признаков производился с помощью таблиц сопряженности, при этом применялся двусторонний точный критерий Фишера. Различия считались достоверными при р<0,05. Оценка нормальности распределения параметров проводилась методами Шапиро-Уилкокса и Лиллиефорса. |
Определение ААТ к Pi-AP в сыворотке крови проводилось в лаборатории ксенотрансплантации ПИИТ и НО Росздрава (руководитель-д.м.н.,проф. Гонсвицкий А.Г.) методом прямого иммунофермснтного анализа с использованием в качестве антигена синтетического фрагмента, содержащего 26 аминокислот второй петли Pi-AP (197 222) [25]. За отрицательный контроль было принято среднее арифметическое значение + 2 стандартных отклонения (M+2SD) оптических плотностей ранее полученных в этой лаборатории в группе 20 здоровых доноров. Исследования иммунного статуса проводилось в отделе Активации иммунитета ГНЦ Института иммунологии МЗиСР РФ. Иммунный статус исследовали методами лазерной цитометрии, хемилюминесценции, иммунодиффузии. Количество клеток и фенотип лимфоцитов, относящихся к различным популяциям, а также молекулярные маркеры активации, зрелости и функциональной специализации клеток анализировали методом иммунофлуоресценции с помощью моноклональных антител и проточного лазерного цитофлюориметра FACSCalibur фирмы Becton Dickinson. Определение зрелых цитолитических CD8* Т-лимфоцитов и NK-клеток ex vivo проводили по содержанию внутриклеточного перфорина методом проточной лазерной цитофлуорометрии. О состоянии фагоцитарной активности нейтрофилов периферической крови судили по интенсивности фагоцитоза меченых флюоресцеином бактерий E.coli с последующей оценкой результатов на проточном лазерном цитофлюориметре. Функциональные ответы нейтрофилов на опсонизированный зимозан и ФМА измеряли по хемилюминесценции клеток. Концентрацию иммуноглобулинов IgG, IgA, IgM определяли турбодиметрическим методом с помощью наборов фирмы Human, иммуноглобулина IgE иммуноферментным методом с помощью наборов «Диа Плюс», циркулирующие иммунные комплексы турбодиметрическим методом по скорости образования агрегатов в 3% и 4% полиэтиленгликоле. При описании изменений иммунного статуса приводится процент случаев в анализируемой группе больных со значением показателя выше верхней границы нормы (ВЫ) или ниже нижней границы нормы (НН). 3. Методы статистической обработки результатов исследования. Статистическую обработку данных проводили с использованием пакета программ “Statistica” (“StatSoft”, США, версия 6.0). В связи с тем, что распределение изучаемых параметров [уровень СРБ, показатели сцинтиграфии миокарда с 1231 МИБГ (ПДИ, ГДИ, соотношение С/С. скорость вымывания)] отличалось от нормального, при сравнении групп использовали критерий Манн-Уитни соответственно парному t-критсрию, результаты представлены в виде медианы с интерквартильным размахом (ИР, 25-й 75-й процентиль). Корреляционный анализ проводили по методу Спирмена. Анализ качественных признаков производился с помощью таблиц сопряженности, при этом применяли двусторонний точный критерий Фишера. Различия считались достоверными при р<0,05. Оценку нормальности распределения параметров проводили методами Шапиро-Уилкокса и Лиллиефорса. |