|
40 2.53 Методы неследодания коагуляционного звена гемостаза Определение активированного частичного тромбопяастинового времени (АЧТВ) АЧТВ —тест проводился путем инкубации образца цитратной плазмы с контактным активатором, таким как эллаговая кислота. Такая инкубация вызывает в плазме активацию XII фактора, свертывания (фактора Хагемана). Затем к образцу добавляют заменитель тромбоцитарною фактора 3 фосфолипиды (обычно кефалин из мозга кролика, фосфолипиды сои или хи смеси) и ионы Са2+ (в виде раствора хлорида кальция). После этого при температуре 37°С регистрируют время, необходимое для образования сгустка. Определение протромбипового времени Протромбиновое время является скрининговым тестом для оценки свертывания но внешнему пути активации. Анализ ПВ проводится при добавлении смеси тромбоштастина и кальция к цитратной плазме, а результаты тестирования выражают в виде Международного Отношения (МНО) и протромбиновой активности по Квику (с использованием калибровочной кривой). 'Гест проводился с помощью набора STA Neoplastbi Plus фирмы Roche Diagnostics. Определение протромбинового индекса Протромбштовое время определяли методом Квика. В пробирку вносили 0.1 мл испытуемой плазмы крови, 0.1 мл суспензии чромбошшетина. Пробирку ставили в водяную батпо при 375С на 60 секунд. Затем приливали 0.1 мл 0.025 (V I хлорида калыщя и включали секундомер. Отмечали время свертывания крови. Протромбиневый индекс вычисляли по формуле: |
Для приготовления плазмы, обогащенной тромбоцитами, кровь центрифугировали при 1000 об/мин в течение 5 минут [Балуда В.П. и др., 1980]. 2.4.2 Методы исследования громбоцнтарно) о звена гемостаза Определение количества тромбоцитов Подсчет количества циркулирующих тромбоцитов в цельной крови производили с использованием гематологического автоматизированного счетчика Cobas Micros 18 (Roche). Определение агрегационной активности тромбоцитов Агрегацию тромбоцитов проводили на анализаторе агрегации тромбоцитов «Биола». В качестве активаторов тромбоцитов использовали вещества поврежденной сосудистой стенки (АДФ, Коллаген, Ристоцетин). 2.4.3 Методы исследования коагу ляционного звена гемостаза Определение активированного частичного тромбопластинового времени (АЧТВ) АЧТВ тест проводился путем инкубации образца цитратной плазмы с контактным активатором, таким как эллаговая кислота. Такая инкубация вызывает в плазме активацию XII фактора свертывания (фактора Хагемана). Затем к образцу добавляют заменитель тромбоцитарного фактора 3 фосфолипиды (обычно кефалин из мозга кролика, фосфолипиды сои или хи смеси) и ионы Са2 ~(в виде раствора хлорида кальция). Далее при температуре 37°С регистрируют время, необходимое для образования сгустка. Определение протромбинового времени Протромбиновое время является скрининговым тестом для оценки свертывания по внешнему пути активации. Анализ Г1В проводится при добавлении смеси 'фомбопластина и кальция к нитратной плазме, а результаты тестирования выражают в виде Международного Отношения (МНО) и протромбиновой активности но Квику (с использованием калибровочной кривой). Гест проводился с помощью набора STA Neoplastin Plus фирмы Roche Diagnostics. Определение протромбинового индекса Протромбиновое время определяли методом Квика. В пробирку вносили 0.1 мл испытуемой плазмы крови, 0.1 мл суспензии тромбопластина. Пробирку ставили в водяную баню при 37°С на 60 секунд. Затем приливали 0.1 мл 0.025 М хлорида кальция и включали секундомер. Отмечали время свертывания крови. Протромбиновый индекс вычисляли по формуле: А — х 100, где В А —протромбиновое время плазмы крови донора; В —протромбиновое время исследуемого лица. Индекс выражали в процентах (%). Определение количества фибриногена Набор для определения концентрации фибриногена по Клауссу STA Fibrinogen фирмы Roche Diagnostics. Тромбоэластография Тромбозластофафию крови выполняли на приборе тромбоэластографе путем регистрации процессов образования фибрина и фибринового сгустка с • последующей его ретракцией при исследовании образца крови или плазмы е предварительной рекалъцификацией раствором хлорида кальция (1,29%). |