д ) после инкубации пробирки доливали доверху хлористым натрием, содержимое пробирок перемешивали и центрифугировали, после чего надосадочную жидкость отсасывали. Такое отмывание эритроцитов повторяли 34 раза. е) в каждую пробирку к отмытым эритроцитам добавляли 4-7 капель NaCl для получения 5% взвеси (так как при отмывании эритроциты частично захватываются, интенсивность взвеси контролируется глазом); ж) одну кашпо (0,05мл) взвеси эритроцитов из каждой пробирки переносили на белую фарфоровую или любую другую белую пластинку со смачиваемой поверхностью и к каждой капле прибавляли по 1 капле (0,05мл) сыворотки, приготовленной для пробы Кумбса. з) сыворотку тщательно перемешивали с эритроцитами (стеклянной палочкой или углом предметного стекла), после чего пластинку слегка покачивали. При этом наблюдали результат (наличие или отсутствие агглютинации эритроцитов). Агглютинация начиналась в течение первых 10-30 сск., но при слабом титре резус-антител процесс может длиться до 20 мин. З.Тоактовка результатов. Наличие агглютинации в каплях с образцами резус-положительных эритроцитов и отсутствие ее с рсзус-отрицательпыми и собственными эритроцитами указывает на присутствие неполных резус антител. 4-Титрование сывороток, содержащих неполные резус-антитела. а) в штатив устанавливали 10 пробирок с обозначениями 1:2; 1:4; 1:8 и т.д. до 1:1024. б) во вес пробирки вводили по три капли (0,15 мл) NaCl. в) в первую пробирку (с обозначением 1:2) вводят 3 капли (0,15 мл) исследуемой сыворотки. Из первой пробирки, после перемешивания ее содержимого, исследуемый материал переносили в следующую и т.д. до последней пробирки, из которой три капли удаляли. В результате в пробирках получались разведения испытуемой сыворотки от 1:2 до 1:1024. |
надосадочную жидкость отсасывали. Такое отмывание эритроцитов повторяли 3-4 раза. е) в каждую пробирку к отмытым эритроцитам добавляли 4-7 капель NaCl для получения 5% взвеси (так как при отмывании эритроциты частично захватываются, интенсивность взвеси контролируется глазом); ж) одну каплю (0,05мл) взвеси эритроцитов из каждой пробирки переносили на белую фарфоровую или любую другую белую пластинку со смачиваемой поверхностью и к каждой капле прибавляли по 1 капле (0,05мл) сыворотки, приготовленной для пробы Кумбса. з) сыворотку тщательно перемешивали с эритроцитами (стеклянной палочкой или углом предметного стекла), после чего пластинку слегка покачивали. При этом наблюдали результат (наличие или отсутствие агглютинации эритроцитов). Агглютинация начиналась в течение первых 1030 сек., но при слабом титре резус-антител процесс может длиться до 20 мин. 3.Трактовка результатов. Наличие агглютинации в каплях с образцами резус-положительных эригроцитов и отсутствие ее с резус-отрицательным и и собственными эритроцитами указывает на присутствие неполных резус антител. 4.Титрование сывороток, содержащих неполные резус-антитела. а) в штатив устанавливали 10 пробирок с обозначениями 1:2; 1:4; 1:8 и т.д. до 1:1024. б) во все пробирки вводили по три капли (0,15 мл) NaCl. в) в первую пробирку (с обозначением 1:2) вводят 3 капли (0,15 мл) исследуемой сыворотки. Из первой пробирки, после перемешивания ее содержимого, исследуемый материал переносили в следующую и т.д. до последней пробирки, из которой три капли удаляли. В результате в пробирках получались разведения испытуемой сыворотки от 1:2 до 1:1024. г) во все пробирки добавляли пастеровской пипеткой по одной маленькой капле (0,01 мл) стандартных резус положительных эритроцитов 50 |