|
1,0 х 106 микробных тел уже через 24 часа развивалась клиника острой воспалительной реакции, поэтому концентрация 1,0 х 106микробных тел и была выбрана для дальнейшего проведения эксперимента. Полученную культуру золотистого стафилококка вводили в десневой карман экспериментального животного. Для определения концентрации антибиотика в лимфатических узлах их извлекали у собак через 1, 3, 6, 9, 12, 18, 24, 36 и 48 часов, гомогенезировали, добавляли равный по массе объем изотонического раствора хлорида натрия. Концентрацию цефотаксима в биологических субстратах определяли традиционным методом диффузии в агаре с использованием в качестве тестмикроба спор Bac/Subtilis ТСС 8241 (Навашин С.М., Фомина И.П., 1982). Экспериментальные исследования производились в соответствии с приказом М3 от 12.08.77 —«О мерах по дальнейшему совершенствованию организационных форм работы с использованием экспериментальных животных». 2.3. Изучение состояния мягких тканей лицевой области и регионарных лимфатических узлов при воспалении Известно, что при любом воспалении, в том числе и тканей зуба происходит нарушение постоянства внутренней среды в тканях пародонта и регионарных лимфатических узлах как результат агрессии. Целью настоящего исследования явилось изучение состояния мягких тканей лицевой области и реакции лимфоидных клеток лимфоузлов в условияхэкспериментального воспаления. Через 1,3,5 суток после завершения эксперимента проводили забор биоматериала (тканей пародонта и подчелюстных лимфоузлов). Все виды эксперимента осуществляли под эфирным наркозом. Эвтаназия животных проводилась перезозировкой наркотического препарата. Гистологические препараты мягких тканей и лимфоузлов лицевой области готовили для сканирующей электронной микроскопии, а также для определения пролиферативной активности путем окрашивания их моноклональными антителами типа PCNA, реагирующими с белком циклином. |
фоузлов). Все виды эксперимента осуществляли под эфирным наркозом. Эвтаназия животных проводилась передозировкой наркотического препарата. Гистологические препараты ткани десны и лимфоузлов готовили для сканирующей электронной микроскопии, а также для определения пролиферативной активности путем окрашивания их моноклональными антителами типа PCNA, реагирующими с белком циклином. Таблица 2. Распределение животных, использованных в эксперименте, по изучениюреактивных преобразований пародонтита ирегионарных лимфатическихузлов вусловиях подготовки зубов к протезированию. Группы экспериментальных животных Число животных Сроки забора материала 1-я группа интактные животные 3 В любое время 2-я группа, обработка зубов которым проводилась в «щадящем режиме» 6 1,3,5 суток 3-я группа, обработка зубов которым провоР дилась в «агрессивном режиме» 6 1,3,5 суток Для получения центральной лимфы использовали метод наружного дренирования грудного лимфатического протока (ГЛП) на шее. Дренирование ГЛП осуществляли при положении животного на спине с фиксированными конечностями. Разрезом по средней линии шеи от грудинной вырезки и выше на 6-7 см рассекали кожу, подкожную клетчатку. Кровоточащие сосуды тщательно лигировали. После рассечения фасции частично остро, частично тупым путем выделяли из окружающих тканей яремную вену, которую брали на держалку и отводили латерально. ГЛП находился в толще жировой клетчатки, окружающей венозный угол. Чаще всего наблюдали впадение ГЛП в вену одним стволом. Диаметр ГЛП колебался в пределах 1-3 мм. Проток выделяли на расстоянии 1-3 см и подводили под него две шелковые лигатуры, подтягивали одну из лигатур и вскрывали ГЛП в продольном направлении. Затем в проток вводили полихлорвиниловый катетер, диаметр которого модифицировался в зависимости от просвета сосуда. Наиболее удобно и целесообразно дренировать ГЛП в области восходящй части его дуги. В этом отделе отсутствие клапана позволяет ввести катетер на глубину до 2 см, ось катетера совпадает с осью сосуда (Уртаев Б.М., 1977г.). Катетер вводили через рану. Рану ушивали. Для определения концентрации антибиотика в лимфатических узлах их извлекали у собак через 1, 3, 6, 9, 12, 18, 24, 36 и 48 часов, гомогенезировали, добавляли равный по массе объем изотонического раствора хлорида натрия. Концентрацию цефотаксима в биологических субстратах определяли традиционным методом диффузии в агаре с использованием в качестве тестмикроба спор Вас/ Subtilis ТСС 8241 (Навашин С.М., Фомина И.П., 1982; Гаузе Г.Ф. и соавт., 1989). Экспериментальные исследования производились в соответствии с приказом М3 от 12.08.77 «О мерах по дальнейшему совершенствованию организационных форм работы с использованием экспериментальных животных». ноцитогенез т. е. пролиферативную активность иммунокомпетентных клеток. Индекс митотической активности у контрольных животных составлял 11,39±2,44. После лимфотропного введения кетонала через 12 часов было наибольшее увеличение пролиферативной активности (14,01±1,87). Это свидетельствует о том, что кетонал не оказывает каких-либо необратимых изменений при его лимфотропном введении на структуру лимфатического узла. Третья серия экспериментов. На 11 беспородных собаках массой от 9,5 до 14,3 кг изучилась фармакинетика цефотаксима при различных способах его введения в условиях экспериментального воспаления. Концентрацию цефотаксима определяли в сыворотке крови, лимфе и регионарных (подчелюстных) лимфатических узлах. Антибиотик вводили внутримышечно, эндолимфатически и лимфотропно в претрахеальную клетчатку в У дозе 15 мг/кг массы животного. Для эндолимфатического введения антибиотика катетеризацию периферического лимфатического сосуда у животных осуществляли доступом на границе верхней и средней трети переднебоковой поверхности голени. Для получения центральной лимфы использовали метод наружного дренирования грудного лимфатического протока на шее. Экспериментальная модель воспаления в мягких тканях шеи и подчелюстной области создавалась с учетом вида микробного агента и резистентности организма. Использовался золотистый стафилококк L-500 (штамм 13407), выделенный от больного сепсисом. Для определения концентрации антибиотика в лимфатических узлах их извлекали у собак через 1, 3, б, 9, 12, 18, 24, 36 и 48 часов, гомогенезировали, добавляли равный по массе объем изотонического раствора хлорида натрия. Проведенный анализ фармакокинетики у экспериментальных животных показал, что через 6 часов исследуемый антибиотик при внутривенном |