|
4.2. Методы исследования 4.2.1, Среды культивирования Lamblia intestinalis Для получения культур Lamblia intestinalis использовали среды Павловой, Zierdt, Джоясона и Suresh. Среда Павловой содержит лошадиную сыворотку, однозамещенный фосфорнокислый калий и двузамещенлый фосфорнокислый натрий. Перед лосевом в каждую пробирку добавляют 1-2 петли мелкого стерильного рисового крахмала. В двухфазной яичной среде Циерта в качестве твердой фазы использовали коагулированное в скошенном положении содержимое куриного яйца. Жидкая фаза представляла собой раствор Хенкса или Среду 199 с добавлением сыворотки крови кур, крупного рогатого скота, лошади. Анаэробные условия достигались путем наслаивания на среду 1-2 мл стерильного масла, pH среды 7,0-7,2. Аксеничность среды достигается путем добавления на 1 мл среды 4 тыс. ЕД. ампициллина, 1 тыс. ЕД. срептомицина и 500 мг амфотсрицина. Среда Суреша содержала экстракт дрожжей, однозамещенный фосфорнокислый калий и двузамещенный фосфорнокислый калий. В случае, необходимости длительного культивирования в среду вносили полную бактериологическую петлю культуры Proteus vulgaris, выращенную на скошенном мясопептонном агаре при температуре 37° С (Suresh et al., 1993). 4.2.2. Методы изучения бактериальной флоры кишечника Исследование качественного и количественного состава микрофлоры кишечника проводили согласно Приказа № 535 от 22.04.1985 М3 РСФСР «Об унификации микробиологических методов исследования, применяемых в клинико-диагностических лабораториях и лечебно-профилактических учреждениях» определяли качественный и количественный состав микрофлоры в пересчете на 1 г фекалий. Посев фекалий осуществляли на 30 |
50 посевом в каждую пробирку добавляли 1-2 петли мелкого стерильного рисового крахмала. В двухфазной яичной среде Циерта в качестве твердой фазы использовали коагулированное в скошенном положении содержимое куриного яйца. Жидкая фаза представляла собой раствор Хенкса или Среду / 199 с добавлением сыворотки крови кур, крупного рогатого скота, лошади. Анаэробные условия достигались путем наслаивания на среду 1-2 мл стерильного масла, pH среды 7,0-7,2. Аксеничность среды достигвется путем добавления на 1 мл среды 4 тыс. ЕД. ампециллииа, 1 тыс. ЕД. срептомицинна J и 500 мг амфотерицина. Среда Суреша содержала экстракт дрожжей, однозамещенный фосфорнокислый калий и двузамещенный фосфорнокислый калий. В случае, необходимости длительного культивирования в среду вносили полную бактериологическую петлю культуры Proteus vulgaris, выращенную на скошенном мясопегтгопном агаре при температуре 37° С (Suresh et al., 1993). 5.2.2. Методы изучения бактериальной флоры кишечника Изучение микробного состава кишечника проводили согласно Приказу № 535 от 22.04.1985 М3 РСФСР «Об унификации микробиологических методов исследования, применяемых в клинико-диагностических лабораториях и лечебно-профилактических учреждениях». При этом определяли качественный и количественный состав микрофлоры кишечника в пересчете на 1 г фекалий. Посев фекалий осуществляли на дифференциально-диагностические и элективные среды: Эндо, Плоскирева, Сабуро, Блаурокка. При этом учитывали общее количество бактерий семейства Enterobacteriaceae, лактобацилл, бифидобактерий, стафилококков, стрептококков и дрожжеподобных грибов. Таксономическую принадлежность изолированных микроорганизмов оценивали на основании |