|
цитологического исследования шеечных мазков (РАР smear test), которая включает 5 типов: I тип атипические клетки отсутствуют, нормальная цитологическая картина; И тип незначительное изменение клеточных элементов обусловлено воспалительным процессом, проявляющееся в небольшом увеличении ядра, появлении клеток метаплазированного эпителия; III тип имеются единичные клетки с изменениями соотношения ядра и цитоплазмы, дискариоз, диагноз недостаточно ясен, требуется повторение цитологического исследования или необходимо гистологическое исследование биоптированной ткани для изучения состояния ШМ; IV тип обнаруживаются отдельные клетки с признаками злокачественности, а именно с увеличенными ядрами и базофильной цитоплазмой, неравномерным распределением хроматина; V тип в мазке имеются многочисленные атипические клетки. Важным являлось выявление изменений клеток эпителия при инфицировании ПВИ, выявление койлоцитов, дис-, паракератоза. 1\ 1орфологическое исследование удаленных кондилом производили в отделении патоморфологии. Биопсию шейки матки, удаление крупных кондилом влагалища и вульвы, полипэктомию у беременных проводили радиохирургическим методом с применением прибора «Surgitron» («Ellman Int.» США). Высокочастотный радиохирургический прибор с исходной частотой 3,8 МГц использовали различных режимах работы: фильтрованная волна, полностью и частично выпрямленная волна (режимы: разрез, разрез с коагуляцией, коагуляция и гемостаз). Весь удаленный материал подвергался гистолог ическому исследованию. Материал фиксировался в растворе 10% нейтрального формалина. Кусочки тканей заливались в парафиновые блоки, готовили микротомные срезы толщиной 5-7 мкм, которые после стандартных гистологических |
фосфорновольфрамовой кислотой и оранжевым G, затем световым зеленым, Бисмарком коричневым и эозином Y. Приоценке результатов цитологического исследования пользовались классификация по Папаниколау, самой распространенной классификацией цитологическогоисследования шеечных мазков (PAP smear test), которая включает 5 типов: I тип — атипические клетки отсутствуют, нормальная цитологическая картина; II тип — незначительное изменение клеточных элементов обусловлено воспалительным процессом, проявляющееся в небольшом увеличении ядра, появлении клеток метаплазированного эпителия; III тип имеются единичные клетки с изменениями соотношения.ядра и цитоплазмы, дискариоз, диагноз недостаточно ясен, требуется повторение цитологического исследования или необходимо гистологическое исследование биоптированной ткани для изучениясостояния ШМ; IV тип1 обнаруживаются отдельные клетки с признаками.. злокачественности, а именно с увеличенными ядрами и. базофильной цитоплазмой, неравномерным распределением хроматина; V тип в мазке имеются многочисленные атипические клетки. Важным являлось выявление изменений клеток эпителия при инфицировании ПВИ, выявление койлоцитов, дис-, паракератоза. Морфологическое исследование би оти тов шейки матки, влагалища и вульвы производили в лаборатории патоморфологии МОНИИАГ (руководитель к.м.н. Баринова И.В.). Биопсию шейки матки, удаление крупных кондилом влагалища, и вульвы, полипэктомшо у беременных проводили радиохирургическим методом с применением прибора «Surgitron» («Ellman Int.» США). Высокочастотный радиохирургический прибор с исходной частотой 3,8 МГц использовали 58 различных режимах работы: фильтрованная волна, полностью и частично выпрямленная волна (режимы: разрез, разрез с коагуляцией, коагуляция и гемостаз). Весь удаленный материал подвергался гистологическому исследованию. Материал фиксировался в растворе 10% нейтрального формалина. Кусочки тканей заливались в парафиновые блоки, готовили микротомные срезы толщиной 5-7 мкм, которые после стандартных гистологических проводок окрашивались гематоксилином и эозином, а также пикрофуксином по Ван-Гизону. Помимо рутинных методик (окраска гематоксилином и эозином, пикрофуксином по Ван-Гизону), окрашивались по Вейгерту (эластический каркас сосудов), проводилась импрегнация солями серебра по Футу. Препараты исследовали с помощью светового микроскопа. Определение рецепторов в биоптатах шейки матки С целью определения рецепторов эстрогенов ипрогестерона использовался стрептавидин-биотиновый набор Novostain Universal Qwick Kit (“Novocastra”). Срезы, наклеенные на поли-Ь-лизиновые стекла; после депарафинирования подвергали микроволновой обработке в 0,01М нитратном буфере (pH 6,0) в течение 15 минут для демаскировки антигенов. Блокирование эндогенной пероксидазной активности осуществлялось 3% водным раствором перекиси водорода. Для избежания неспсцифической адсорбции первичных антител проводилась инкубация с нормальной неиммунной сывороткой в течение 15 минут. Инкубацию проводили при температуре 25°С в течение 30 минут. После каждой процедуры обработки срезы промывали в трис I-ICL буфере 0,05М, (pH 7,6). Хромогеном служил ДАБ, срезы докрашивали гематоксилином. Для позитивного контроля использовались срезы ткани опухоли с известной экспрессией ER и PR (рак молочной железы), для отрицательного первичные антитела исключали из протокола и заменяли неиммунной сывороткой. 59 |