|
После этого производилась инкубация с хромогенным субстратом. Вносили 100 мкл раствора субстрата в каждую ячейку и инкубировали 15 ±2 мин в цветная реакция останавливалась добавлением 100 мкл раствора 3N НС1. Измерение оптической плотности образцов производилось не позднее двух часов при 450 нм. Рисунок 2. ОБРАЗЕЦКАЛИБРОВОЧНОЙКРИВОЙ ОСТЕОКАЛЬЦИНА Концентрация остеокальцина Затем рассчитывались средние значения для дублей оптических плотностей за вычетом среднестатистической плотности для стандарта А. Строился калибровочный график, где по оси ординат откладывались скорректированные оптические плотности пяти стандартов (B-F), против соответствующих концентраций остеокальцина по оси абсцисс (см. рис. 4). Интерполяцией определясь концентрация остеокальцина контролей и образцов пациентов. Согласно данным фирмы производителя харатеристики метода следующие: предел детекции метода: 0,5 нг/мл эта концентрация соответствует двум стандартным отклонениям от среднего значения 20-ти определений бланка. Норма остеокальцина сыворотки крови —8,8-37,6 нг/мл. |
динат откладывались скорректированные оптические плотности пяти стандартов (B-F), против соответствующих концентраций ОКЦ по оси абсцисс. Методом интерполяции определялась концентрация ОКЦ контролей и образцов пациентов. Согласно данным фирмы производителя предел детекции 0,5 нг/мл, что соответствует двум стандартным отклонениям от среднего значения 20ти определений бланка. Норма —8,8-37,6 нг/мл. 5.4. СТАТИСТИЧЕСКАЯ ОБРАБОТКА ПОЛУЧЕННЫХРЕЗУЛЬТАТОВ Обработка полученных результатов проводилась с использованием программного пакета “STATISTICA FOR WINDOWS 5.2”, а также по оригинальным программам, в которых использовались формулы, приведенные в соответствующих руководствах (10, 79). |