|
ческой мембраны. Аминокислоты а-субъединицы способны изменять участок, чувствительный к оуабаину, в двух больших областях: одна включена в первый и второй трансмембранные домены и экстрацеллюлярную петлю, их соединяющую, а вторая сформирована экстрацеллюлярными половинами трансмембранных регионов IV, V, VI и VII (252). Наиболее чувствительна к оуабаину в эксперименте а-изоформа АТФ-азы (287), возможно, вследствие того, что оуабаин принимает участие в экспрессии генной последовательности, кодирующей а-субъединицу фермента; назначение его в эксперименте ведет к развитию гипертрофии миокарда (238). Ингибирование синтеза белка начинается в течение одного часа после добавления оуабаина, а ингибирование синтеза РНК и ДНК через два часа или даже позже. В литературе встречаются данные об использовании синтетического аналога оуабаина ЛНД623, величины токсической и ингибирующей доз которого значительно отличаются. При назначении ЛНД623 животным в эксперименте был отмечен значительный инотропный кардиальный эффект, который связан с ингибированием Na,KАТФ-азы (261). Замечено, что в клинике кардиальный эффект строфантина блокируется низкими дозами канренона (368). Известно о существовании эндогенного дигиталис-подобного иммунореактивного фактора стероидного типа, содержащего в своей структуре оказывающего ингибирующее влияние на АТФ-азу в раз личных тканях (251). Природным ингибитором АТФ-азы является ацетилхолин. Механизм его действия заключается во влиянии на транслоказную стадию активации фермента и выражается в снижении вероятности конформационных переходов (6). В эксперименте и клинике обнаружено множество других ингибиторов и активаторов АТФ-азы; уровень фермента в разных тканях колеблется при физиологических и патологических изменениях. По данным литературы, эндогенные вещества с молекулярной массой 220 Da и 400 Da являются активаторами АТФ-азы, а с массой 150 Da оказывают ингибирующее действие (207). Инсулин, катехоламины, р2-агонисты и теофиллин относят к активаторам АТФ-азы (241), гормоны щитовидной железы, в частности, L-трийодтиронин, к ее инги |
баланса (142). В возбудимых тканях (нервная, мышечная) особое значение приобретает электрогенность Na-насоса (14). В экспериментах на животных была показана ключевая роль Na.K-АТФ-азы в транспорте медиатора норадреналина в нервных окончаниях коры головного мозга (433). АТФ-аза является наиболее важным фактором в индуцированной глюкозой секреции инсулина панкреатическими р-клетками (768). АТФ-аза кардиомиоцитов играет ключевую роль в механизме Франка-Старлинга (268). Установлено, что активность АТФ-азы подвержена возрастным изменениям. В эксперименте на животных было продемонстрировано повышение уровня АТФ-азы на 50% в мышечной ткани зрелых особей по сравнению с юными, что сопровождалось нарушением соотношения между изоформами: а 1 и р1 -субъединицы обнаруживали увеличение экспрессии, тогда как а2 и р2 -субъединицы отличались сниженным синтезом (730). Отмечается большая лабильность активности фермента у молодых особей при воздействии на них ингибиторов АТФ-азы (790). Диета также влияет на уровень активности АТФ-азы. Было показано, что назначение животным в эксперименте гиперхолестероловой диеты вело к значительному снижению активности фермента; этот эффект нивелировался приемом витамина Е (217). По данным некоторых авторов, наблюдалось повышение активности васкулярной АТФ-азы при ожирении у экспериментальных животных (401). Существует ряд веществ, избирательно ингибирующих Na.K-АТФ-азу. К ним относится оуабаин, или строфантин G, кардиотонический гликозид, который широко используется в исследованиях натриевого насоса. Интересно, что он является потенциальным ингибитором синтеза белков, ДНК и РНК в Ти В-лимфоцитах. Все человеческие изозимы АТФ-азы высокоаффинны к данному препарату. Оуабаин присоединяется к АТФ-азе с наружной стороны плазматической мембраны. Аминокислоты а-субъединицы способны изменять участок, чувствительный к оуабаину, в двух больших областях: одна включена в первый и второй трансмембранные домены и экстрацеллюлярную петлю, их соединяющую, а вторая сформирована экстрацеллюлярными половинами трансмембранных регионов IV, V, VI и VII (541). Наиболее чувствительна к оуабаину в эксперименте а-изоформа АТФ-азы (628), возможно, вследствие того, что оуабаин принимает участие в экспрессии генной последовательности, кодирующей а-субъединицу фермента; назначение его в эксперименте ведет к развитию гипертрофии миокарда (515). Ингибирование синтеза белка начинается в течение одного часа после добавления оуабаина, а ингибирование синтеза РНК и ДНК через два часа или даже позже. В литературе встречаются данные об использовании синтетического аналога оуабаина ЛНД623, величины токсической и ингибирующей доз которого значительно отличаются. При назначении ЛНД623 животным в эксперименте был отмечен значительный инотропный кардиальный эффект, который связан с ингибированием Na,KАТФ-азы (555). Замечено, что в клинике кардиальный эффект строфантина блокируется низкими дозами канренона (782). Известно о существовании эндогенного дигиталис-подобного иммунореактивного фактора стероидного типа, содержащего в своей структуре лактонное кольцо и оказывающего ингибирующее влияние на АТФ-азу в различных тканях (538). Природным ингибитором АТФ-азы является ацетилхолин. Механизм его действия заключается во влиянии на транслоказную стадию активации фермента и выражается в снижении вероятности конформационных переходов (14). В эксперименте и клинике обнаружено множество других ингибиторов и активаторов АТФ-азы; уровень фермента в разных тканях колеблется при физиологических и патологических изменениях. По данным литературы, эндогенные вещества с молекулярной массой 220 Da и 400 Da являются активаторами АТФ-азы, а с массой 150 Da оказывают ингибирующее действие (456). Инсулин, катехоламины, р2-агонисты и теофиллин относят к активаторам АТФ-азы (522), гормоны щитовидной железы, в частности, L-трийодтиронин, к ее ингибиторам (691). Ингибирующее действие на фермент оказывают также мочевина (478), ионы Са2+ (281), флавоноиды (775) и фактор, активирующий тромбоциты (460). К веществам, подавляющим активность АТФ-азы in vivo, относят предсердный натрийуретический фактор (255). Экспериментально доказано различное воздействие протеинкиназ А и С на изоформы фермента (265). Так, активация протеинкиназы С ведет к ингибиции всех изозимов АТФазы, протеинкиназа А стимулирует активность аЗр1 и уменьшает активность а1 Р1 и а2р1 изозимов. Считается, что протеинкиназа С оказывает ингибирующее влияние на АТФ-азу путем воздействия на метаболизм арахидоновой кислоты, зависящий от цитохрома Р450 (228). Циклический АМФ реализует свое ингибирующее действие на АТФ-азу каскадным методом, активируя протеинкиназу А и повышая выработку эндогенного N0 (459). Этот момент |