клеточной концентрации Na приводит к возрастанию активности АТФ-азы. Возможно поэтому, что увеличение проницаемости мембраны по отношению к катионам является первичным эффектом действия митогенов, тогда как повышение активности катионного насоса представляет собой непосредственный компенсаторный ответ на это (16). Каплан и Оуэнс (233) предположили, что следствием важного для активации клетки увеличения активности АТФ-азы будет возросшая конкуренция за ограниченное количество АТФ между АТФазой и аденилатциклазой, объясняющая наблюдаемое экспериментально временное уменьшение концентрации цАМФ. Повышение концентрации К+в среде до 50 мМ приводит к деполяризации мембраны В-клеток, хотя без дополнительных сигналов об индукции синтеза ДНК не происходит (276). Установлено, что вслед за быстрым двухфазным подъемом уровня АТФ-азы наступает медленное пролонгированное повышение активности, которое связывают с увеличением синтеза ДНК; по времени вторая фаза активации фермента совпадает с фазой роста лимфоцитов в качестве митогенного ответа (267,22). Обобщая существующие данные, роль АТФ-азы в активации лимфоцитов можно представить следующим образом (16): 1. Акцепторные молекулы на поверхности лимфоцита связывают стимулирующии лиганд и сшиваются друг с другом. 2. Происходит увеличение проницаемости мембраны для одновалентных катионов; это приводит к деполяризации мембраны менее чем за 2 минуты. Локальное повышение концентрации Na+ с внутренней стороны мембраны активирует АТФ-азу. 3. Снижается активность аденилатциклазы вследствие соседства с АТФ-азой, конкурирующей с ней за АТФ. 4. Повышается уровень цАМФ; в стадии поздней активации клетки ядерная цАМФ активирует киназы, которые специфически фосфорилируют кислые негистоновые белки, регулирующие транскрипцию и синтез ДНК. + азы благоприятствует функционированию ряда ферментов, участвующих в акти |
приписываемое повышению активности АТФ-азы, уравновешивается увеличением потока К+ наружу («утечка \С»), так что в целом концентрация К* в клетке не меняется. Кроме того, было установлено, что Na+ входит в клетку, а повышение внутриклеточной концентрации Na+ приводит к возрастанию активности АТФ-азы. Возможно поэтому, что увеличение проницаемости мембраны по отношению к катионам является первичным эффектом действия митогенов, тогда как повышение активности катионного насоса представляет собой непосредственный компенсаторный ответ на это (64). Каплан и Оуэнс (480) предположили, что следствием важного для активации клетки увеличения активности АТФ-азы будет возросшая конкуренция за ограниченное количество АТФ между АТФ-азой и аденилатциклазой, объясняющая наблюдаемое экспериментально временное уменьшение концентрации цАМФ. Повышение концентрации К* в среде до 50 мМ приводит к деполяризации мембраны Вклеток, хотя без дополнительных сигналов об индукции синтеза ДНК не происходит (593). Установлено, что вслед за быстрым двухфазным подъемом уровня АТФ-азы наступает медленное пролонгированное повышение активности, которое связывают с увеличением синтеза ДНК; по времени вторая фаза активации фермента совпадает с фазой роста лимфоцитов в качестве митогенного ответа (561,98). Установлено, что экто-АТФ-аза с молекулярным весом 70-100 кДа идентична антигену CD39, который присутствует на мембранах В-клеток, натуральных киллеров, моноцитов-макрофагов и фолликулярных дендритных клеток, причем выяснено, что CD39 экспрессируется исключительно на активированных лимфоцитах (159). Обобщая существующие данные, роль АТФ-азы в активации лимфоцитов можно представить следующим образом (64): 1. Акцепторные молекулы на поверхности лимфоцита связывают стимулирующий лиганд и сшиваются друг с другом. 2. Происходит увеличение проницаемости мембраны для одновалентных катионов; это приводит к деполяризации мембраны менее чем за 2 минуты. Локальное повышение концентрации Na+ с внутренней стороны мембраны активирует АТФ-азу. 3. Снижается активность аденилатциклазы вследствие соседства с АТФ-азой, конкурирующей с ней за АТФ. 4. Повышается уровень цАМФ; в стадии поздней активации клетки ядерная цАМФ активирует киназы, которые специфически фосфорилируют кислые негистоновые белки, регулирующие транскрипцию и синтез ДНК. 5. Уровень внутриклеточного К*, достигнутый вследствие действия АТФ-азы, благоприятствует функционированию ряда ферментов, участвующих в активации клетки. Из этого следует, что уровень АТФ-азы в лимфоцитах повышается через 10-15 минут от начала стимуляции клетки, в стадию ранней активации, и в последующих стадиях ведет к синтезу ДНК и белков, участвующих в функционировании активированных лимфоцитов. Роль АТФ-азы в фагоцитарных реакциях также подтверждается данными литературы. Например, слияние вирусной и клеточной мембраны происходит в специализированных вакуолях с определенным значением pH. Образование вакуолей происходит в начале эндоцитоза с участием плазматической мембраны. Этот процесс регулируется АТФ-азой (19). Таким образом, определение уровня активности N a\«^-зависимой АТФазы в лимфоцитах и нейтрофилах периферической крови может способствовать выяснению механизмов активации ИКК при различных РЗ. Использование данного метода наряду с другими иммунологическими и лабораторными данными может внести вклад в понимание некоторых звеньев патогенеза аутоиммунных болезней и помочь в оценке влияния на них противоревматической терапии. 3.4 Миелопероксидаза: физико-химические свойства, распространение в природе, биологическая роль Миелопероксидаза, исходя из природы катализируемых ею реакций, относится к классу оксидоредуктаз, группе гидроксипероксидаз. Согласно номенклатуре ферментов, подготовленной под эгидой Комиссии по номенклатуре МБС (IUB) и принятой Международным биохимическим союзом и Международным союзом теоретической и прикладной химии (44, 363), ее классификационный шифр КФ 1.11.1.7 объединяет под одним общим названием группу ферментов, идентичных функционально и по составу активного центра, но несколько отличающихся свойствами апоферментов. МП является членом семейства гомологичных пероксидаз млекопитающих, которое |