|
{Вымораживание (-20°С, 24~ч) [Высаливание примесей сульфатом аммония (100% насыщения) Обессоливание замено^растворитсля (этанол)! Гельфильтрация на 5ерЬас!ех 0-50 Схема 1. Технологический процесс получения носителей антикоагулянтной активности из сапропеля. Результаты этих экспериментов показали, что в каждом из них характер зависимости для эффекторов I и II примерно одинаков направленность кривых однотипна. В то же время, чем сложнее тест, тем выше концентрация эффекторов, требуемая для достижения одной и той же эффективности торможения реакции свертывания. Так, если принять за 100% концентрацию эффекторов, обусловливающих 30%-е торможение реакции в тесте “Время рекальцификации» 117 |
104сле обработки носителей папаином эти показатели составили 35 и 30% соответственно. В случае же, когда на эффекторы действовали трилсиново-папаиновой смесью, антикоагулянтная активность обоих эффекторов полностью исчезала. Таким образом, полученные данные однозначно свидетельствуют о пептидной природе изучаемых эффекторов свертывания. Имея в своем распоряжении чистые эффекторы свертывания и зная их природу, мы перешли к изучению механизмов ограничения свертывания эффекторами I и II порознь. Для этого прежде всего мы определили характер влияния в зависимости от их концентрации на весь процесс плазмокоагуляции, когда задействованы все факторы внутреннего пути свертывания; на процесс коагуляционного превращения фибриногена в реакции участвуют только тромбин и фибриноген; на процесс аутополимеризации мономерного фибрина используется активированный фибриноген и реакция состоит из формирования протофибрилл с последующей их агрегацией. Результаты этих экспериментов показали, что в каждом из них характер зависимости для эффекторов I и II примерно одинаков направленность кривых однотипна. В то же время, чем сложнее тест, тем выше концентрация эффекторов, требуемая для достижения одной и той же эффективности торможения реакции свертывания. Так, если принять за 100% концентрацию эффекторов, обусловливающих 30%-е торможение реакции в тесте “Время рекальцификации”, то эта же эффективность торможения реакции взаимодействия тромбина с фибриногеном достигается 71% концентрации тех же эффекторов. Торможение аутополимеризации требует еще меньшие концентрации около 30%. |