|
е.а., 1992/. НЬ/Ша-рецепторы являются самыми распространенными; на поверхности одного тромбоцита содержится примерно 50 ООО рецепторов этого типа. Механизм действия ИЬ/Ша-рецепторов заключается в его способности узнавать две характерные аминокислотные последовательности. Первая состоит из аминокислот К(Ю. Благодаря этому ключевую последовательность КОИ “узнают” большинство представителей семейства интегринов: она обнаружена в фибронектине /Р1ег5сЬЬасЬег М.И., Киоз1аЬи Е., 1984/, факторе Виллебранда, витронектине и в а цепях молекул фибриногена, причем на каждую половину молекулы фибриногена приходится по две ключевых последовательности КСЫ (а-остатки 95-97 и 572-574)/Рагге!1 О.Н. е.а., 1992/. По мнению многих авторов роль этого трипептида заключается в связывании лиганд с рецептором ИЬ/Ша синтетический трипептид конкурентно ингибирует агрегацию тромбоцитов, вызванную АДФ, коллагеном и тромбином без ингибирования деформации тромбоцитов или секреции /ОагТпег Т.К., ВеппеИ .1.8., 1985/. Вторая цепочка аминокислот, «узнаваемая» ИЬ/Ша-рецепторами тромбоцитов, представляет собой ЬООАКСЗАСЮУ, она расположена в карбоксильной цепи у-цепи фибриногена (у-остатки 402-411) и не обнаружена у других лиганд /Юосгемак М. е.а., 1984/. Предполагается, что именно в этом месте фибриноген связывается с ПЬ/Шарецепторами /РагтеЦ Э.Н. е.а., 1992., \Уе1зе11.\У. е.а., 1992/, хотя связь между «узнаваемыми» аминокислотными цепочками до конца не ясна. Так, показано, что синтетические пептиды, соответствующие СООНконцевой последовательности у-цепи фибриногена 403-411, используемые для анализа специфичности распознавания связывающих тромбоциты участков фибриногена, фибронектина и ф. Виллебранда, не ингибировали связывание ,251-фибриногена с тромбоцитами. Напротив, 35 |
-20(3-субъедица (ОР Ша) имеет молекулярную массу 92 кДа и состоит из единственного полипептида, содержащего 762 аминокислотных остатка, с коротким цитоплазматическим хвостом, трансмембранной областью и большим внеклеточным доменом. Сохранность гетеродимерной структуры обеспечивают ионы Са++, нековалентно связывая субъединицы аи (3друг с другом /Ые\утап е.а., 1985/. По данным электронной микроскопии комплекс ИЬ/Ша включает два фибриллярных и один глобулярный домен. При встраивании изолированного комплекса в фосфолипидные везикулы глобулярный домен располагается снаружи от липосомальной оболочки, погружаясь в нее концами фибриллярных доменов /Са1уе1е е.а., 1995/. Таким образом, комплекс ПЬ/Ша связан с плазматической мембраной тромбоцита в двух точках на полюсах фибриллярных доменов. Фибриллярные структуры представлены С-концевыми участками СР НЬ и малой цепи СР Ша, а большая часть комплекса экстрацеллюлярна /Л\^е15е1 е.а., 1992/. ИЬ/Ша-рецепторы являются самыми распространенными; на поверхности одного тромбоцита содержится примерно 50 ООО рецепторов этого типа. Механизм действия НЬ/Ша-рсцспторов заключается в их способности узнавать две характерные аминокислотные последовательности. Первая состоит из аминокислот КСШ. Благодаря этому ключевую последовательность РСЮ “узнают” большинство представителей семейства интегринов: она обнаружена в фибронектине /Р1ег$сйЬасНег, Кио$1аЫ1, 1984/, факторе Виллебранда, витронектине и в а-цепях молекул фибриногена, причем на каждую половину молекулы фибриногена приходится по две ключевых последовательности КОБ (а-остатки 95-97 и 572-574)/"\Уаи е.а., 1979; РаггеН е.а., 1992/. По мнению многих авторов роль этого трипептида заключается в связывании лиганд с рецептором ИЬ/Ша -21 синтетический трипептид конкурентно ингибирует агрегацию тромбоцитов, вызванную АДФ. коллагеном и тромбином без ингибирования деформации тромбоцитов или секреции / Оаг1пег, ВсппеИ, 1985/. Вторая цепочка аминокислот, «узнаваемая» ПЬ/Шарецепторами тромбоцитов, представляет собой последовательность ЬСЮАКрАСШУ, расположенную в карбоксильном участке у-цепи фибриногена (у-остатки 402-411) и не обнаруженную у других лигандов /К1осге\\чак е.а., 1984/. Предполагается, что именно в этом месте фибриноген связывается с ПЬ/Ша-рецепторами /РаггеН е.а., 1992; АУе15е1 е.а., 1992/, хотя связь между «узнаваемыми» аминокислотными цепочками до конца не ясна. Так, показано, что синтетические пептиды, соответствующие СООНконцевой последовательности у-цепи фибриногена 403-411, используемые для анализа специфичности распознавания связывающих тромбоциты участков фибриногена, фибронектина и ф. Виллебранда, не ингибировали связывание 1251-фибриногена с тромбоцитами. Напротив, у-402-411 проявлял дозазависимое ингибирование связывания фибриногена с АДФ и тромбин-индуцированными живыми или зафиксированными тромбоцитами и выступал как конкурентный антагонист. Ингибирующая активность не изменялась при добавлении одного у-401-411 или двух у-400-411 глициловых остатков в 1МН2-концевом участке. Этот же процесс наблюдался в отношении связывания ,251-фибронектина и 1251-ф. Виллебранда. Способность пептидов ингибировать связывание лиганд с экспрессивными рецепторами клеток исключает влияние на индукцию рецептора, следовательно, три адгезивных белка совместно используют общий участок распознавания на активированных тромбином тромбоцитах, а декапептид, соответствующий у-402-411, определяет специфику распознавания этого участка /Р1о\у, СппзЬег^, 1981; |