Таким образом, как следует из таблиц 5 и 6, антикоагулянт связывается как с фибриногеном, так и с фибрином , однако в последнем случае комплексообразование менее выражено. Таким образом, результаты вышеприведенных экспериментов свидетельствуют, что взаимодействие ингибитора плазмокоагуляции с субстратом реакции фибриногеном происходит, минуя активные центры полимеризации, и следовательно, эффект антикоагулянта не зависит от количества открытых активных центров. Далее мы попытались определить характер этого взаимодействия. В первой серии экспериментов изучали зависимость скорости самосборки фибрина от значения рН или ионной силы среды, в которой протекает процесс в отсутствие (контроль ) и в присутствии экстракта. Необходимые значения рН в системе самосборки создавали, используя для разбавления фибринмономера 0,075 М боратный буфер с различными значениями рН. Рисунок 23. Зависимость скорости самосборки от рН в отсутствие (1) и в присутствии (2) ингибитора. Абсцисса значение рН; ордината скорость реакции. 86 |
-226 на, действие ингибитора на процесс самосборки прекращается, что полностью подтверждает высказанное выше предположение о преимущественном влиянии изучаемого антикоагулянта на начальные этапы неферментативного процесса коагуляционного превращения фибриногена. Рисунок 59. Зависимость скорости (с^хЮО) реакции взаимодействия тромбина с фибриногеном (ордината) при внесении ингибитора в реакционную смесь через равные интервалы времени (с) после инициации реакции, с (абсцисса). 1 контроль, 2 опыт. Далее мы попытались определить характер этого взаимодействия. В первой серии экспериментов изучали зависимость скорости самосборки фибрина от значения рН или ионной силы среды, в которой протекает процесс в отсутствие (контроль) и в присутствии экстракта. Необходимые значения рН в системе самосборки создавали, используя для разбавления фибринмономера 0,075 М боратный буфер с различными значениями рН. -228 Рисунок 61. Зависимость скорости самосборки от рН в отсутствие (1) и в присутствии (2) ингибитора. Абсцисса значение рН; ордината скорость реакции. Возникновение электростатических взаимодействий между мономерным фибрином и ингибитором самосборки нами подтверждено дополнительно при изучении влияния на этот процесс ионной силы: если взаимодействие происходит за счет электростатических связей, то эффективность торможения самосборки должна изменяться и при изменении ионной силы (Белицер В.А., Варецкая Т.В., 1975). Ионную силу в экспериментах изменяли, используя для провокации самосборки фибрина боратный буфер (0,075 М, рН 7,6) с различным содержанием хлорида натрия. Эти растворы использовали для разбавления раствора мономерного фибрина в контрольных (без ингибитора) и опытных (с ингибитором) пробах. Как видно на рисунке 62, эффективность торможения самосборки фибрина экстрактом из сапропеля возрастает с повышением ионной силы в среде самосборки, что в сочетании с данными, полученными при изучении влияния на скорость самосборки в присутствии ингибитора, однозначно свидетельствует о роли элек |