|
гибитора, однозначно свидетельствует о роли электростатических взаимодействий в реализации тормозящего эффекта экстракта из сапропеля. Для выявления других возможых типов взаимодействий ингибитора с субстратом, мы изучили скорость самосборки в присутствии мочевины, как соединения, конкурирующего за водородные связи. Мочевину в возрастающих количествах прибавляли к буферному раствору, использовавшемуся для провокации самосборки. Полученные результаты (табл. 7) указывают на то, что во взаимодействии ингибитор мономерный фибрин водородные связи существенной роли не играют. В противном случае не наблюдался бы рост эффективности торможения при повышении концентрации мочевины. Рисунок 24. Зависимость эффективности торможения самосборки от ионной силы. Абсцисса концентрация хлорида натрия в среде самосборки, М; ордината эффективность торможения. 88 |
80пептид приобретает свойство активировать самосборку при существенной блокаде способности к ионизации отрицательно заряженных функциональных групп. По-видимому, пептидный ингибитор, является фактором, ослабляющим электростатические взаимодействия между молекулами мономерного фибрина путем блокады участков связывания. Для выявления других возможных типов взаимодействия ингибитора с субстратом мы изучили скорость самосборки в присутствии мочевины как соединения, конкурирующего за водородные связи. Мочевину в возрастающих количествах прибавляли к буферному раствору, использующемуся для разбавления фибринмономера. Если водородные взаимодействия играют сколько нибудь существенную роль в связывании ингибитора с фибрином, то повышение концентрации мочевины в среде самосборки, затрудняя взаимодействие фибрин-фибрин и ингибитор-фибрин, не должно заметным образом сказываться на эффективности торможения. По нашим данным скорость самосборки без ингибитора и в его присутствии линейно снижалась с увеличением концентрации мочевины. Расчет эффективности торможения для разных концентраций мочевины выявляет линейное снижение ингибиторного эффекта, пропорциональное снижению мочевины (рис. 7). Экстраполяция кривых до оси абсцисс позволяет установить, что в присутствии ингибитора самосборка прекращается при концентрации мочевины 0,72. Для того, чтобы остановить процесс самосборки без введения ингибитора, требуется создать концентрацию мочевины, приближающуюся к 1,06 М. -229 тростатических взаимодействий в реализации тормозящего эффекта экстракта из сапропеля. Рисунок 62. Зависимость эффективности торможения самосборки от ионной силы в отсутствии (1) и в присутствии (2) ингибитора. Абсцисса концентрация хлорида натрия в среде самосборки, М; ордината эффективность торможения. Для выявления других возможных типов взаимодействий ингибитора с субстратом, мы изучили скорость самосборки в присутствии мочевины, как соединения конкурирующего за водородные связи. Мочевину в возрастающих количествах прибавляли к буферному раствору, использовавшемуся для провокации самосборки. Полученные результаты (табл. 43) указывают на то, что во взаимодействии ингибитор мономерный фибрин водородные связи существенной роли не играют. В противном случае не наблюдался бы рост эффективности торможения при повышении концентрации мочевины. Для выявления роли гидрофобных взаимодействий в эффекте ингибитора мы изучили изменения эффективности торможения в интервале температур от 2° С до 40°С (рис. 63). |