|
2.1.2. МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 48 2 .1 .2 .1 . Методика изучения микрофлоры кишечника В ходе исследований у экспериментальных животпых проводили изучение микрофлоры кишечника. Забор фекалий для микробиологического исследования производили в стерильные флаконы с использованием при заборе стерильных стеклянных палочек после естественной дефекации из глубины исследуемого материала. При изучении микробного пейзажа кишечника согласно Приказа № 535 от 22.04.85 М3 РСФСР «Об унификации микробиологических методов исследования, применяемых в юшнико-диашостических лабораториях и лечебнопрофилактических учреждениях», определяли как частоту высевасмосга отдельных видов, так и их количественные показатели в пересчете на 1 г фекалий (Сорокин, Федорова, 1990; Крылов, Козлович, Решетнева и др., 1994). Основное разведение (1:100) получали из навески испражнений (100мг), из которой в дальнейшем готовили десятикратные разведения (до 1:100000000). Посев осуществляли на дифферешшально-диагностические и элективные среды. При этом учитывали: 1) общее количество бактерий; 2) лактобацилл; 3) бифидобактерий; 4) микробов семейства Enterobacteriaceae; 5) стафилококков; 6) стрептококков; 7) дрожжеподобных грибов (табл. 3). Таблица 3 Среды, использованные при изучении кишечной микрофлоры № п/п Среда Микроорганизмы Условия культивирования 1 1 1 III IV 1. Эндо,.висмут-сульфит агар Эшерихии, Другие энтеробактерни 24 ч, аэробное, +37° С |
52 2.2.7. Методика изучения микрофлоры киш ечника В ходе исследований у экспериментальных животных проводили изучение нормальной микрофлоры кишечника, а также выделение возможных энтеропатогенов для исключения сопутствующих кишечных инфекций. Забор фекалий у больных для микробиологического исследования производили в стерильные флаконы с использованием при заборе стерильных стеклянных палочек после естественной дефекации из глубины исследуемого материала. Количественный и качественный состав микрофлоры определяли по методике H.Hacnel (1973) в модификации В.С.Крамарь с соавт. (1974) с оценкой биоценоза по М.Э.Микельсаар (1988). Основное разведение (1:100) получали из навески испражнений (100мг), го которой в дальнейшем готовили десятикратные разведения (до 1 : 100000000). Посев осуществляли на дифференциально-диагностические и элективные среды. При этом учитывали: 1) обшее количество бактерий; 2) лактобациллы; 3) бифидобактерии; 4) микробы семейства Enterobacteriасеае; 5) стафилококки; 6) стрептококки; 7) дрожжеподобные грибы (табл.4). Таблица 4 Среды, использованные при изучении кишечной микрофлоры № п/п Среда Микроорганизмы Условия культивирования I 11 111 IV 1. Эндо, висмутсульфит агар Эшсрихии, Другие энтеробактерци 24 ч, аэробное, +37иС 2. Блаурокка Бифидобактерии 3-4 сут, анаэробное, +37иС 3. МРС-4 Лактобациллы 4 сут, анаэробное, +37° С |