|
Для гистохимической идентификации углеводов (мукополисахаридов, гликогена) использовали реакцию с Шифф-йодной кислотой* для чего срезы помещали в реактив Шиффа (Ромейс Б., 1953). Морфологическое исследование биоптатов проводили в соответствии с рекомендациями, изложенными в многочисленных работах, посвященных теоретическому обоснованию и конкретному применению этих методов (Вейбель Е.Р. 1970; Автандилов ГХ. 1990; Weibel E.R. 1979)* Биоптаты подвергали морфометрическому изучению с использованием окулярной сетки из 25 точек (Автандилов ГХ. 1990). Подсчитывали численную плотность воспалительного инфильтрата в ткани биоптатов на единицу с площади среза ткани (5,63x10 мкм") и процентное отношение облитерированных сосудов в биоптате к общему количеству сосудов на единицу площади среза ткани. 2.2.9. Статистические методы исследования. Статистический анализ осуществлялся на персональном компьютере «Pentium» с использованием библиотеки статистических функций. Количественную оценку полученных данных проводили методами вариационной статистики. Для анализа полученных результатов использовали расчет средних арифметических величин (М) и их ошибок (ш), среднеквадратичное отклонение (6), Достоверность различий средних значений оценивали с использованием критерия Стьюдента (t). На основе критерия достоверности по таблице определялся уровень значимости полученного результата. Разность считалась достоверной при р<0,05. Корреляционный анализ проводили по методу К. Пирсона. Факторный анализ исследованных параметров проводили с помощью пакета статистических программ SPSS 13.0. |
Д.С., Перов Ю.Л. 1996). Из каждого биоптата изготавливали по 3-4 микроскопических среза. Для гистохимической идентификации углеводов (мукополисахаридов, гликогена) использовали реакцию с Шифф-йодной кислотой, для чего срезы помещали в реактив Шиффа (Ромейс Б., 1953). Иммунногистохимическое исследование биоптатов проводили стрептавидин биотиновым методом с применением моноклональных антител к коллагену I, II, IV типов («NOVOCASTRA»). Оценку результатов исследования проводили полуколичественным методом по степени окрашивания тканей (Саркисов Д.С., Перов Ю.Л., 1996). Морфологическое исследование биоптатов проводили в соответствии с рекомендациями, изложенными в многочисленных работах, посвященных теоретическому обоснованию и конкретному применению этих методов (Вейбсль Е.Р. 1970; Автандилов Г.Г. 1990; Weibel E.R. 1979). Биопгаты подвергали морфометрическому изучению с использованием окулярной сетки из 25 точек (Автандилов Г.Г. 1990). Подсчитывали численную плотность воспалительного инфильтрата в ткани биоптатов на единицу площади среза ткани (5,63x10s мкм2) и процентное отношение облитерированных сосудов в биоптате к общему количеству сосудов на единицу площади среза ткани. Для исследования в трансмиссионном электронном микроскопе брали образцы биоптатов объемом 1мм3 в количестве 7-8 от одного биоптата, фиксировали в 1% водном растворе OSO4 на фосфатном буфере (pH 1.1-1A) (Milloning G., 1962), дегидратировали в серии спиртов в возрастающей концентрации и заключали в ЭПОН 812 (Миронов А.А. и др., 1994). От каждого биоптата получали по 5 блоков образцов. Из каждого блока на пирамитоме LKB 11800 получали иолутонкие срезы (1 мкм), которые окрашивали 0,5% водным раствором толуидинового синего на 0,5% растворе тетраборнокислого натрия при температуре 80°С. Блоки затачивали и приготавливали на ультрамикротоме LKB 8800 ультратонкие срезы, контрастировали их водными растворами уранилацетата и С целью предварительного исследования зубов и окружающих их структур проводили ортопантомографию, обеспечивающую получение плоского изображения изогнутых поверхностей объемных областей (Персии Л.С. с соавт., 2003). Изучали структуру кости, характер деструктивных костных изменений, наличие зон остеопороза, состояние кортикальных пластинок, периодонтальной щели, а также анатомические особенности зубных рядов. Исследование проводили на рентгеновском комплексе «Ортослайс—1000» (Франция). С целью уточнения диагноза проводили прицельную рентгенографию зубов и окружающих их структур на дентальном рентгеновском аппарате «Evolution» (Италия). При помощи боковых телерентгенограмм головы (ТРГ) оценивали относительную ретрузию или выступание верхней или нижней челюсти и их отношение к черепу, переднюю и заднюю высоту лица и его пропорции, расхождение верхней и нижней челюсти, направление роста лицевого скелета. Исследование проводили на рентгеновском комплексе «Ортослайс —1000» (Франция), в боковой проекции с расстояния 1,5 м. 2.2.5. Статистические методы исследования Статистический анализ осуществлялся на персональном компьютере «Pentium» с использованием библиотеки статистических функций. Количественную оценку полученных данных проводили методами вариационной статистики. Для анализа полученных результатов использовали расчет средних арифметических величин (М) и их ошибок (ш), среднеквадратичное отклонение (5). Достоверность различий средних значений оценивали с использованием критерия Стьюдента (t). На основе критерия достоверности по таблице определялся уровень значимости полученного результата. Разность считалась достоверной при р<0,05. Корреляционный анализ проводили по методу К. Пирсона. Факторный анализ исследованных параметров проводили с помощью пакета статистических программ SPSS 13.0. |