|
23 Эти методы наиболее распространенные и используются для определения широкого круга, как низкомолекулярных, так и высокомолекулярных соединений антител, гормонов, вирусных и бактериальных антигенов, пестицидов, токсинов. Особую значимость для широкого внедрения ИФА в практику имела разработка в качестве носителей для сорбционной иммобилизации антител и антигенов специальных полистироловых плат, состоящих из 96 лунок. Факт сорбции антител на поверхности полистирола был установлен в середине 60-х годов и использован первоначально в методах радиоиммунологического анализа (РИА)[34]. Радиоиммунный метод является самым чувствительным (на уровне пкг/см3). Однако ему присущи определенные недостатки: ограниченный срок жизни радиоактивной метки; необходимость дорогостоящего оборудования; радиационная опасность для персонала [57]. В то время как ИФА имеет ряд преимуществ: высокая стабильность реагентов, невысокая стоимость анализа, отсутствие отходов загрязняющих окружающую среду и не опасен для здоровья экспериментатора [84]. Введение в практику ИФА полистироловых планшет позволило значительно увеличить число проводимых анализов и упростить методическую процедуру его выполнения. Были сконструированы специальные приборы, позволяющие автоматизировать постановку реакции и осуществлять одновременную регистрацию кшалитической активности фермента метки в каждой из лунок полистиролового планшета. ИФА допускает и визуальную оценку результатов, а это делает его доступным для обычных практических лабораторий. Эти достоинства позволили ИФА занять ведущее место среди методов иммунологической диагностики инфекционных болезней вирусной, бактериальной и празитарной природы. В процессе развития ИФА определились основные направления его применения: I. Количественное определение содержания антигенов и антител в биологических жидкостях; |
12 ферментами компонентов положило начало методам твердофазного иммуноферментного анализа (Engvall, Perlmann, 1971). Эти методы наиболее распространенные и используются для определения широкого круга, как низкомолекулярных соединений, так и высокомолекулярных соединений антител, гормонов, вирусных и бактериальных антигенов, пестицидов. Особую значимость для широкого внедрения ИФА в практику имела разработка в качестве носителей для сорбционной иммобилизации антител и антигенов специальных полистирольных плат, содержащих 96 лунок. Факт сорбции антител на поверхности полистирола был установлен в середине 60-х годов и использован первоначально в методах радиоиммунологического анализа (РИА) (А.М. Егоров, с соавт., 1991). За разработку метода авторы Р. Йолоу и С. Берсон в 1977 году были удостоены Нобелевской премии; Радиоиммунный метод является самым чувствительным (на уровне пкг/мл). Однако ему присущи определенные недостатки: ограниченный срок жизни радиоактивной метки; наличия дорогостоящего оборудования; радиационная опасность для персонала (Т. Чард, 1981). В то время как ИФА имеет ряд преимуществ: высокая стабильность реагентов, невысокая стоимость анализа, отсутствие отходов загрязняющих окружающую среду и не опасен для здоровья экспериментатора (Carlies et al., 1981). Введение в практику ИФА полистироловых планшет позволило значительно увеличить число проводимых анализов и упростить методическую процедуру его выполнения. Были сконструированы специальные приборы, позволяющие автоматизировать постановку реакции и осуществлять одновременную регистрацию каталитической активности фермента метки в каждой из лунок полистиролового планшета. ИФА допускает и визуальную оценку результатов, а эта делает его доступным для обычных практических лабораторий. Эти достоинства позволили ИФА занять |