|
26 выявления специфических антител к вирусу методом ИФА [43]. На основе иммуноферментного анализа впервые разработан диагностикум реовирусного теносиновита кур [30]. Авторами разработки получен патент № 2192012 на изобретение от 3.07.2000г. Набор обладает высокой чувствительностью и специфичностью, предназначен для выявления в сыворотке крови и желтке яиц специфических антител к возбудителю реовирусного теносиновита и применяется для ретроспективной диагностики и оценки поствакцинального иммунитета при данной болезни [30]. Среди множества публикаций имеются работы, посвященные применению ИФА, для диагностики парвовирусной инфекции гусей. М. Фадель с соавт. [55] разработали «сендвич»-вариант ИФА для обнаружения вируса энтерита (парвовируса) гусей в патматериале от больных и экспериментально зараженных птиц. Показано, что метод специфичен и высокочувствителен и может применяться для сравнительного титрования количества антигена [55]. В 1990 году зарубежными авторами Liao, Lu [159] предложили метод ELISA в сравнении с методом латексной агглютинации для обнаружения антигена вируса болезни Держи. Разработанный двойной сэндвич (антигенный захват) ELISA на основе антител для обнаружения антигена вируса болезни Держи в клеточных культурах, представляет возможность определения точного количества вируса [154]. Блокирующий вариант ELISA был разработан для определения количества антител в сыворотке крови гусей к вирусу болезни Держи [137,154]. Авторы отмечают, что метод хорошо коррелирует с реакцией вируснейтрализации. Впервые в 2006 году в РФ для серологической диагностики вирусного энтерита гусей разработана иммуноферментная тест-система для количественного определения специфических антител в сыворотке крови гусей [27]. Данная разработка подтверждена патентом «Способ определения специфических антител к вирусу энтерита гусей» [16]. Позднее метод был усовершенствован и внедрен в ветеринарную практику как «Набор для выявления антител к вирусу энтерита в сыворотках крови гусей методом иммуноферментного анализа». |
14 был усовершенствован и внедрен в ветеринарию (Н.В. Никитина, А.С. Дубовой, 2003). Обстоятельные исследования по применению непрямого метода ИФА для выявления специфических антител к вирусу инфекционного ларинготрахеита были проведены П.Ю. Котляром (1995). Изучение инфекционного бронхита кур (ИБК) рядом авторов закончилось разработкой набора компонентов для выявления специфических антител ИБК методом ИФА (В.Д. Сергеев с соавт., 1995). На основе иммуноферментного анализа впервые разработан диагностикум реовирусного теносиновита кур (Н.В. Никитина с соавт., 1998). Авторами разработки получен патент JM® 2192012 на изобретение от 3.07.2000г. Набор обладает высокой чувствительностью и специфичностью, предназначен для выявления в сыворотке крови и желтке кур специфических антител к реовирусу теносиновита и применяется для ретроспективной диагностики (Н.В. Никитина, Б.Б. Трефилов, 2001) и оценки поствакцинального иммунитета против данного заболевания. Среди теперь уже значительного количества публикаций, посвященных применению ИФА для диагностики вирусных инфекций, число работ по энтериту гусей невелико. М. Фадель с соавторами в 1989 году разработали метод ИФА для выявления вируса энтерита (парвовируса) гусей в патматериале от больных и экспериментально зараженных птиц. Показано, что метод специфичен и высокочувствителен, может применяться для сравнительного титрования количества антигена (М. Фадель, 1989). Для обнаружения вируса в тканях инфицированных животных и в клеточных культурах, выращенных на стекле, зарубежными авторами были предложены иммунофлюоресцентная (К.П. Комиссаров, 1976; А.Ф. Бондаренко, 1982; Schettler, 1972; Labie, 1972; Dvorak, Dvorakova, 1980; Kisary, 1985) и иммунопероксидазная (Rosznowski, 1982). В 1990 году зарубежными авторами Liao, Lu (1990) предложили метод ELISA в сравнении с методом латексной агглютинации для обнаружения антигена вируса болезни Держи. Разработанный двойной сэндвич (антигенный захват) ELISA на основе 15 антител для обнаружения антигена вируса болезни Держи, продуцирующего в клеточных культурах, представляет возможность определения точного количества вируса (Kardi, Szegletes, 1996). Блокирующий вариант ELISA был разработан для определения количества антител в сыворотках гусей к вирусу болезни Держи (Have, Hansen, 1981, Kardi, Szegletes, 1996). Авторы отмечают, что метод хорошо коррелирует с реакцией вируснейтрализации. Kwang ct al. (1987, 1988) предложили метод ELISA-тест для определения антител к болезни Держи. Информация о применении метода ИФА для серодиагностики вирусного энтерита гусей в отечественной литературе полностью отсутствует. Однако разработка такого высокочувствительного и специфичного метода крайне необходима. 2.2 Краткие исторические данные, распространение вирусного энтерита (парвовирусной инфекции) гусей и ущерб, причиняемый этим заболеванием Вирусный энтерит гусей Enteritis virosa anserculorum острая, контагиозная болезнь молодняка гусей и мускусных уток, характеризующаяся преимущественным поражением желудочно-кишечного тракта и других паренхиматозных органов и сопровождающаяся высокой смертностью (Л.М. Контримавичус, 1971, 1978; В.В. Малушко с соавт., 1980; Б.Б. Трефилов, 1990,2000). О заболевании птиц вирусным энтеритом первые сообщения появились одновременно во многих странах: Венгрии (Derzsy et al, 1966), Голландии (Cleef, van Miltelnburg, 1966), СССР (Л.К. Контримавичус с соавт., 1966), наблюдавшие его у гусят и утят мускусных уток в возрасте 1-30 суток. Они доказали инфекционную природу заболевания и описали его, назвав разными синонимами. |