Диагноз на бабезиоз ставили комплексно с учётом клинических признаков, эпизоотологических данных, ксенодиагностики и результатов лабораторных исследований мазков крови. Учёт иксодовых клещей на животных проводили путём полного осмотра поверхности тела с указанием мест локализации паразитов. Видовую принадлежность клещей устанавливали с использованием «Атласа иксодоидных клещей» под редакцией И.М.Ганиева и А.А.Аливердиева (1968), а также «Атласа паразитов крови животных и клещей иксодид» под редакцией В.Ф.Капустина (1955). Для идентификации клещей использовали микроскоп МБР-3 и бинокулярную лупу МБИ-9. Клинически животных обследовали по следующей схеме: общее состояние животного, температура тела, состояние сердечно-сосудистой системы, органов дыхания, желудочно-кишечного канала, слизистых оболочек. Температуру тела измеряли, как правило, дважды утром и вечером на протяжении всего периода наблюдения. Контрольных животных обследовали одновременно с подопытными в течение всего периода исследований. Возрастной состав у контрольных и опытных животных был одинаковый. При выполнении работы использовались общепринятые методики. Гематологические и биохимические исследования проводили в динамике инвазии. Количество эритроцитов и лейкоцитов определяли в I мкл по общепринятой методике в камере Горяева, содержание гемоглобина определяли колориметрическим методом по Сали. С целью обнаружения сроков появления бабезий в крови животных и изучения динамики паразитемии из периферической крови животных ежедневно готовили мазки, которые фиксировали метиловым спиртом в течение 3-5 минут и окрашивали по Романовскому-Гимза. Микроскоиирование проводили под иммерсионной системой микроскопа МБР-3. Интенсивность паразитемии выражали в процентах путём учёта поражённых эритроцитов к общему числу эритроцитов, если их количество было более 1 %, или в численном выражении 46 |
71 2. Собственные исследования 2.1. Материалы и методы исследований Работу выполняли с 2005 по 2008 г.г. на кафедре паразитологии и инвазионных болезней животных МГАВМиБ им. К.И.Скрябина, в лаборатории Одинцовского района Московской области, а также в хозяйствах Брянской и Калужской областей. При выполнении работы использовались общепринятые методики. Распространение бабезиоза, видовой состав клещей-переносчиков и их распространение, динамику заклещевения животных, сезонно-возрастную динамику развития инвазии и сроки первичного заражения изучали в хозяйствах Брянской и Калужской областей с различными природно-хозяйственными условиями, с промышленной и традиционной технологией содержания живот ных на крупном рогатом скоте различных половозрастных групп и пород на основании сбора и анализа статистических данных ветеринарных лабораторий за ряд лет, общего клинического обследования и микроскопии мазков крови от естественно больных животных, заражённых в указанных областях, сбора и установления видов клещей, снятых с животных, при этом учитывали распространение клещей в зависимости от природно-климатических условий местности. Диагноз на бабезиоз ставили комплексно с учётом клинических признаков, эпизоотологических данных, ксенодиагностики и результатов лабораторных исследований мазков крови. Учёт иксодовых клещей на животных проводили путём полного осмотра поверхности тела с указанием мест локализации паразитов. Видовую принадлежность клещей устанавливали с использованием «Атласа иксодоидных клещей» под редакцией И.М.Ганиева и А.А.Аливердиева (1968), а также «Атласа паразитов крови животных и клещей иксодид» под редакцией В.Ф.Капустина (1955). Для идентификации клещей использовали микроскоп МБР-3 и бинокулярную лупу МБИ-9. 72 Клинически животных обследовали по следующей схеме: общее состояние животного, температура тела, состояние сердечно-сосудистой системы, органов дыхания, желудочно-кишечного канала, слизистых оболочек. Температуру тела измеряли, как правило, дважды утром и вечером на протяжении всего периода наблюдения. Контрольных животных обследовали одновременно с опытными в течение всего периода исследований. Возрастной состав у контрольных и опытных животных был одинаковый. Гематологические и биохимические исследования проводили в динамике инвазии. Количество эритроцитов и лейкоцитов определяли в 1 мкл по общепринятой методике в камере Горяева, содержание гемоглобина определяли колориметрическим методом по Сали. С целью обнаружения сроков появления бабезий в крови животных и изучения динамики паразитемии из периферической крови животных ежедневно готовили мазки, которые фиксировали метиловым спиртом в течение 3-5 минут и окрашивали по Романовскому-Гимза. Микроскопирование проводили под иммерсионной системой микроскопа аМБР-З. Интенсивность паразитемии выражали в процентах путём учёта поражённых эритроцитов к общему числу эритроцитов, если их количество было более 1 %, или в численном выражении паразитов па 100 полей зрения микроскопа (п.з.м.) в случае незначительного поражения. Параллельно выводили лейкоцитарную формулу по способу Шиллинга. Биохимические исследования были проведены но следующим показателям: общий белок и белковые фракции, ферментативная активность аминотрансфераз (АСТ и АЛТ). Определение количества общего белка проводили рефрактометрическим методом, рефрактометром Аббе, вычисление процента белка проводили но таблице Рейса. Белковые фракции определяли электрофоретически на пластинах ПААГ. 100 2.2.1.3. Видовой состав иксодовых клещей, их распространение Динамика заклещевения животных С учётом того, что для объективной оценки значения видов клещей в эпизоотологии заболевания и разработки научно обоснованных мер борьбы и профилактики необходимы знания видового состава, биологии и экологии переносчиков, мы в течение целого ряда лет проводили сборы иксодовых клещей в изучаемых зонах. В целях определения видового состава клещей, паразитирующих на животных, нами было обследовано 5939 животных, в т.ч. 5382 гол крупного рогатого скота, 286 гол мелкого рогатого скота, 96 гол лошадей и 175 собак в 13 районах Брянской области и в 6 районах Калужской области. Сбор клещей проводили с ранней весны начала нападения паразитов и до поздней осени в хозяйствах с различными природно-хозяйственными условиями и разной эпизоотологической характеристикой в отношении кровопаразитарных болезней, при этом учитывали характер пастбищ и режим их использования под выпас. С животных клещей собирали руками, при этом местами излюбленного расположения паразитов являлись ушные раковины и область за ними, морда, область вокруг рогов, шея, иод1рудок, вымя, паховая область. Собранных клещей помещали в пробирки для последующего их определения до вида. Видовую принадлежность клещей устанавливали с использованием «Атласа иксодоидных клещей» под редакцией И.М. Ганиева и А.А.Аливердиева (1968), а также «Атласа паразитов крови животных и клещей иксодид» под редакцией В.Ф.Капустина (1955). Нашими исследованиями установлено, что в изучаемой зоне распространены 3 вида пастбищных клещей семейства 1хосйс1ае: 1хобе5 пстиз Ыпп.,1758, ОегтасегДог рюШз Непп., 1804 и Осгтасеп1ог таг^ташз 8и1г., 1776. При этом клещ 1хос1с$ пс'тиз был обнаружен нами во всех изучаемых районах, однако распространены клещи отдельными очагами, а нс повсеместно. |