|
48 II группа (п=40) контрольная, животные, которым моделировался перелом голени и заживление происходило без применения каких-либо препаратов; III группа (п~40) опытная, крысы с экспериментальным переломом голени, после механического разделения большеберцовой кости раневую поверхность однократно интраоперационно обрабатывали гелем рекомбинантного ангиогенина человека (0,1 мл) и после этого производили ушивание раны. Животных забивали декапитацией в условиях общего эфирного наркоза на 3, 7, 15 и 30 сутки после травмы. Объектом исследования служил регенерат большеберцовой кости крыс, а так же участок костной ткани, приближённый к зоне травмы. 2.2.3 Морфологические исследования. Для световой микроскопии регенерат большеберцовой кости крыс и прилежащие участки костной ткани фиксировали в 10% нейтральном формалине с последующей декальцинацией в течение 7 дней азотной кислотой, обрабатывали в спиртах в возрастающих концентрациях, заключали в парафин, целлоидин и изготавливали продольные и поперечные срезы, окрашивали гематоксилином и эозином, пикрофуксином по Ван-Гизон согласно общепринятым методикам (Подрушняк Е.П., Суслов Е.И., 1975; Волкова О.В., Елецкий Ю.К., 1982; Хмельницкий О.К. и др., 1983). Для оценки пролиферативной активности остеогенных клеток (остеобластов периоста и периваскулярных клеток расположенных вокруг сосудов Гаверсовых каналов), а так же количества остеоцитов и лииоцитов, определяли их количество на стандарте. Причём, учитывая то, что в периосте делятся только преостеобласты с последующим переходом их в остеобласты, мы подсчитывали общее количество этих клеток, но описывали этот процесс как пролиферативную активность остеобластов. |
Таблица 2.1 48 Характеристика групп животных в эксперименте №/ № Колво Способ воздействия Распределение крыс для морфологического исследования (кость) и взятия крови (Т-, 13лимфоциты) 3 сут. 7 сут. 15 сут. 30 сут. I 10 Интактные крысы 3 3 2 2 II 40 Контрольная группаспонтанное заживление перелома 10 10 10 10 II 40 Опытная группа ежедневные аппликации хитозанового геля, в течении 15 дней, в зоне перелома 10 10 10 10 2.2.2 Характеристика групп животных. Все животные были разделены на группы следующим образом (Табл.2.1): I группа (п=Т0) интактные животные; II группа (11=40) контрольная, животные, которым моделировался перелом голени и заживление происходило без применения каких-либо препаратов; III группа (п=40) опытная, крысы с экспериментальным переломом голени, у которых зона перелома ежедневно, в течении 10 дней, обрабатывалась хитозановым гелем. Животных забивали дскапитацией в условиях общего эфирного наркоза на 3, 7, 15 и 30 сутки после травмы. Объектом исследования служил 49 2.2.3 Морфологические исследования. Для световой микроскопии регенерат большеберцовой кости крыс и прилежащие участки костной ткани фиксировали в 10% нейтральном формалине с последующей декальцинацией в течение 7 дней азотной кислотой, обрабатывали в спиртах в возрастающих концентрациях, заключали в парафин, целлоидин и изготавливали продольные и поперечные срезы, окрашивали гемотоксилином и эозином, пикрофуксином но ВанГизон согласно общепринятым методикам (Подрушняк Е.П., Суслов Е.И., 1975; Волкова О.В., Елецкий Ю.К., 1982; Хмельницкий О.К. и др., 1983). Для оценки пролиферативной активности остеогенных клеток , (остеобластов периоста и периваскулярных клеток расположенных вокруг сосудов Гаверсовых каналов), а так же количества остеоцитов и липоцитов, определяли их количество на стандарте. Причём, учитывая то, что в периосте делятся только преостеобласты с последующим переходом их в остеобласты, мы подсчитывали общее количество этих клеток, но описывали этот процесс как пролиферативную активность остеобластов. Оценка синтетической активности клеток производилась по их морфометрическим показателям: 1) площади фибробластов и остеобластов, I расположенных в периосте; 2) площади остеоцитов в компактном веществе. Для оценки площади жировой ткани измерялся диаметр липоцитов в костномозговом канале (Автандилов Г. Г., 1990). Для характеристики состояния костной ткани в целом, производились измерения толщины костных пластинок, подсчитывались коэффициенты: 1) периостальный (ПКФТ), определяемый отношением толщины клеточного (остеогенного) слоя периоста к толщине его волокнистого слоя; 2) регенерат большеберцовой кости крыс, а так же участок костной ткани, приближённый к зоне травмы. |