|
91 цинского университета под руководством д.м.н., профессора О.Р.Грека [158, 173]. Животным, у которых изучали действие химиотерапевтических средств на структуру регионарных к матке лимфатических узлов, введение осуществляли в фазу преэструса, остальным независимо от фазы эстрального цикла. Относительно метода введения следует отметить, что с целью снижения дозы и усиления воздействия на пораженный регион применяют внутрибрюшинное введение противоопухолевых препаратов не только экспериментальным животным, но и в клинической практике [297, 336, 456, 473, 563, 621, 622, 675, 6 8 6 , 687, 715, 716, 724, 735, 789, 809, 823, 848, 929, 988, 989, 1011, 1020, 1066, 1072, 1078, 1155, 1156, 1166, 1185, 1187-1189, 1299, 1305]. Причем даже однократная внутрибрюшинная инъекция цитостатика экспериментальным животным может приводить к истощению Ти В-клеток в селезенке, лимфатических узлах и сокращению размеров тимуса [526]. Для изучения брыжеечных лимфатических узлов животных декапитировали через 7, 14 и 21 сутки после введения комплекса препаратов. Для исследования подвздошных лимфатических узлов крыс выводили из эксперимента в фазу преэструса через 8 , 16 и 24 суток после химиотерапии. Контролем служили интактные животные и крысы, которым вместо комплекса препаратов для химиотерапии внутрибрюшинно вводили физиологический раствор. Контрольных животных выводили из эксперимента вместе с опытными. Количество животных в контрольных и опытных группах представлено в таблице 1 , всего в двух экспериментах было изучено 146 крыс: 82 животных для исследования брыжеечных лимфатических узлов и 64 крысы для исследования подвздошных. Все манипуляции с животными проводили под эфирным наркозом. Хотя И.П.Западнюк и соавт. [89] сообщают о том, что продолжительность эстрального цикла у крыс 6-7 дней, на основании изготовления влагалищных мазков было установлено, что у изучаемых нами животных продолжительность цикла 4 суток, это совпадает с результатами и других исследователей [21, 125, 176, 245, 897, 1081]. В связи с тем, что необходимо было исследовать структуру регионарных к матке подвздошных лимфатических узлов всех крыс в одну и ту |
77 Опытным животным однократно внутрибрюшшпю вводили комплекс препаратов, применяемый в клинике: циклофосфан (2 1 мг/кг), алрнамицин (2 ,1 мг/кг), шшкристнн (0,04 мг/кг) if предннзолон (2,1 мг/кг) (Мншсшша С.В., 2002; Майбородина В.И., 2003). Выбранная доза является 1/5 LD50. Модель эксперимента разработана на кафедре фармакологии Новосибирской государственной медицинской академии под руководством д.м.н., профессора О.Р.Грек (Мишенина С.В., 2002; Майбородина В.И., 2003). Подобные схемы и дозы введения препаратов используют и другие исследователи (Запускалова О.В. и др., 1989а). Животным, у которых далее изучали действие химиотерапевтических средств на структуру матки и регионарных к ней лимфатических узлов, введение осуществляли в фазу преэструса, остальным независимо от фазы астрального цикла. Далее части этих животных через зонд, непосредственно в желудок, вводили водный экстракт Pcntaphylloidcs fruticosa. Введение осуществляли в утренние часы, ежедневно до конца срока наблюдения в дозе 25 мг/кг или 50 мг/кг. Относительно метода проведения полпхимиотсрапин следует отметить, что с целью снижения дозы и усиления воздействия на пораженный регион применяют внутрнбрюшшшос введение противоопухолевых препаратов нс только экспериментальным животным, но и в клинической практике (Coiman М. et al., 1980; Santoni Л. ct al., 1980; Ferraro C. et al., 2000; Hatton K. et al., 2001; Qi B.Q. et al., 2001; Kimura Y. et al., 2001; Pole R.J. el al., 2001; Zhou B. et al., 2001; Gillick J. et al., 2002; Ioannidcs A.S. ct al., 2002). Причем даже однократная впутрибрюшинная инъекция цитостатика экспериментальным животным может приводить к истощению Ти В-клеток к селезенке, лимфатических узлах и сокращению размеров тимуса (Ferraro С. ct al, 2000). Приготовление водного экстракта курильского чая: Облиственные побеги Pcntaphylloidcs fruticosa в воздушно-сухом состоянии измельчали произвольно до 2-4 см, заливали кипящей водой при соотношении 50:1 (вода к листьям), экстрагировали в течении часа при непрерывном помешивании. Фильтровали, концентрировали через вакуумный испаритель до содержания сухого вещества 2 0 30%. Высушивали в порошок, разводили непосредственно перед применением. 78 Состав сухого порошка: дубильные вещества 25%, флаконы —5%, фенолкарбоновыс кислоты, минеральные вещества в остатке. Для изучения органов пищеварительною тракта животных декантировали через 7, 14 и 21 сутки после введения комплекса препаратов. Для исследования репродуктивных органов крыс выводили из эксперимента в фазу прсэструса через 8, 16 и 24 суток после введения комплекса препаратов. Хотя И.П.Западшок и соавт. (1983) сообщают о том, что продолжительность астрального цикла у крыс 6-7 дней, на основании изготовления влагалищных мазков было установлено, что у изучаемых нами животных продолжительность цикла 4 суток, это совпадает с результатами и других исследователей (Мурашнна А.Н., 1967; Salli М.А., Aron С., 1976; Бабичев В.И., Игнатков В.Я., 1978; Mora О.А. et al., 1985; Сметанина Н.Д., 1989; Котава Л.Г., 1991). В связи с тем, что необходимо было исследовать структуру мазки и регионарных лимфатических узлов всех крыс в одну и ту же фазу цикла и что эстралынлй цикл у этих животных продолжается 4 суток, забор экспериментального материала производили в дни, кратные 4. Контролем служили интактные животные и крысы, которым вместо полихимиотсрапсвтичсских средств виутрибрюшинно вводили физиолог*пеский раствор. Контрольных животных выводили из эксперимента вместе с опытными. Количество животных в контрольных и опытных группах представлено в таблицах 1 и 2, всего была изучена 251 крыса. Все .манипуляции с животными проводили под эфирным наркозом. Кроме этого исследовали замороженные лимфатические узлы из области ворог легких 8 пациентов, удаленные во время пульмонэктомни, проводившейся после полихимиотерашш по поводу первичного рака легкого. Метастазов опухоли в данных узлах обнаружено не было. 2.2. Морфологические методы исследования. Па современном этапе развития медицины световая микроскопия продол |