|
циклических углеводов (включая г-бутил и кумол), различных полиненасыщенных жирных кислот, глицерина, холестерина (7-ООН), прогестерона, прегненолона, простагландина F2a (15-ООН), а также простагландин G2. Исключение составляют: ROOH со стерически экранированными пероксигруппами типа холестерин-25-00//, диалкилпероксидазы; циклические пероксиды типа 1,2-диоксанов и пероксиды липидов. Последние должны гидролизованы фосфолипазой А2[148,248]. быть предварительно Изоэлсктрическая точка ГП 5,0—6,5, оптимум pH 8,5— 8,8, однако активность фермента обычно при pH 7,0—7,5, так как при высоких значениях pH велика спонтанная реакция и ГП становится нестабильной [148,248]. Реакция осуществляется по кинетическому механизму «пинг-понга» [148,192], что полностью соответствует строго последовательному взаимодействию субстратов с ГП. Важная особенность ГП —отсутствие насыщения по GSH и в результате неопределенная, неограниченная VMax. Это согласуется с низкой оккупацией GSH активных центров (50%) и его низким сродством к ферменту. Кажущаяся VMax по ROOH является линейной функцией концентрации GSH. Из этого в принципе вытекает невозможность определения Км [148,192,248]. Значения Км тем больше, чем выше концентрация второго субстрата. Тем не менее, кинетические константы ГП широко определяют, но их сравнение возможно лишь для одной и той же концентрации второго субстрата. Обычно считают, что Vм а х ГП не зависит от природы пероксида, но сродство к нему падает в ряду: Н2 О2 > пероксиды полиненасыщенных жирных кислот и простагландин G2 > кумол-ООН > т-бутил-ООЯ. Величины Км для пероксидов тимина и ДНК не определены. В целом, при миллимолярных концентрациях GSH значения кажущейся Кмравны 10-6 5 10М для встречающихся в клетке пероксидов пероксиды 4 |
все органические перекиси, в том числе пероксиды алифатических и циклических углеводов (включая т-бутил и кумол), различных полиненасыщенных жирных кислот, глицерина, холестерина (7-ООН), прогестерона, прегненолона, простагландина F2a (15-ООН), а также простагландин G2 . Исключение составляют: ROOH со стерически экранированными пероксигруппами типа холестерин-25-0СШ, диалкилпероксидазы; циклические пероксиды типа 1 ,2 -диоксанов и пероксиды липидов. Последние должны быть предварительно гидролизованы фосфолипазой А2 [125,237]. Изоэлсктрическая точка ГП 5,0—6,5, оптимум pH 8,5—8 ,8 , однако активность фермента измеряют обычно при pH 7,0—7,5, так как при высоких значениях pH велика спонтанная реакция и ГП становится нестабильной [125,237]. Реакция осуществляется по кинетическому механизму «пинг-понга» [125,178], что полностью соответствует строго последовательному взаимодействию субстратов с ГП. Важная особенность ГП отсутствие насыщения по GSH и в результате неопределенная, неограниченная VMax. Это согласуется с низкой оккупацией GSH активных центров (50%) и его низким сродством к ферменту. Кажущаяся VMax по ROOH является линейной функцией концентрации GSH. Из этого в принципе вытекает невозможность определения Км [125,178,237]. Значения Км тем больше, чем выше концентрация второго субстрата. Тем не менее, кинетические константы ГП широко определяют, но их сравнение возможно лишь для одной и той же концентрации второго субстрата. Обычно считают, что VMaxГП не зависит от природы пероксида, но сродство к нему падает в ряду: Н2С> 2 > пероксиды полиненасыщенных жирных кислот и простагландин G2 > кушол-ООН > тбутил-ООН. Величины Км для пероксидов тимина и ДНК не определены. В целом, при миллимолярных концентрациях GSH значения кажущейся Км равны 1 0 -6 105 М для встречающихся в клетке пероксидов (Н20 2, |