|
субстратов —пероксидов кумола и т-бутила. Кажущаяся величина Км для GSH в разных условиях ~10-5—10-J М [248]. ГП относительно стабильна при концентрации -1 мг/мл. Ее стабилизируют GSH, дитиотреитол и маркаптоэтанол. При хранении без этих веществ фермент постепенно аутоокисляется, но реактивируется GSH. ГП стабильна по отношению к полиненасыщенным жирным кислотам и их оксипроизводным, Н2 О2 , пероксидам жирных кислот и 3 метилэтилкетона, гаунидинхлориду, пептидазам, подкислению и нагреванию (нагревание при 60° в течение 10 мин снижает активность лишь на 50%). Следовательно, ГП более стабильна, чем каталаза и неселеновая ГП [54]. Однако ГП довольно чувствительна к О2 [148 ]. Восстановленную форму ГП (ESeH) ингибируют йоди хлорацетаты (но не йодацетамид) в результате алкилирования селеноцистеина. Таков же механизм ингибирования пропиленимином. Наиболее окисленную селенитную форму ГП ([ESe ~ ОН), возникающую при обработке Н2 О2 , ингибируют цианиды вследствие потери ферментом Se. ГП ингибируется при высокой ионной силе раствора. Особенно активны поливалентные анионы: фосфаты, сульфаты, малеаты [148,248], вероятно, вследствие нарушения электростатического взаимодействия GSH с остатками аргинина на втором этапе реакции [54]. Ионы Ag 2 + 2+ 2 + Т 1 [248], Си , Hg , Zn и Са ингибируют ГП. Механизм этого эффекта неясен, так как йодацетамид и N-малеимид не влияют на фермент [54,148]. Сильными и специфическими ингибиторами ГП, конкурентными к GSH, служат меркаптокарбоновые кислоты и третичные меркаптаны (меркаптосукцинат, пеницилламин и др.). Сильно ингибирует ГП и аурумтиоглюкоза. Длительное воздействие 100 мкг. хлординитробензола разрушает ГП [54]. Суточная потребность человека в Se Концентрация Se в плазме крови человека равна 90 мкг/л, в эритроцитах 195 мкг/кг. При дефиците Se другие селенопротеиды |
5 н пероксиды жирных кислот, простагландин G2) и 1 0 —1 0М для модельных субстратов —пероксидов кумола и т-бутила. Кажущаяся величина Кмдля GSH в 4 разных условиях ~105 —10-JМ [237]. ГП относительно стабильна при концентрации з 1 МГ/МЛ. Ее стабилизируют GSH. и маркаптоэтанол. При хранении без этих веществ фермент постепенно аутоокисляется, но реактивируется GSH. ГП стабильна по отношению к полиненасыщенным жирным кислотам и их оксипроизводным, Н2 О2 , пероксидам жирных кислот и метилэтилкетона, гаунидинхлориду, пептидазам, подкислению и нагреванию (нагревание при 60° в течение 10 мин снижает активность лишь на 50%). Следовательно, ГП более стабильна, чем каталаза и неселеновая ГП [47]. Однако ГП довольно чувствительна к О2 [125 ]. Восстановленную форму ГП (ESeH) ингибируют йоди хлорацетаты (но не йодацетамид) в результате алкилирования селеноцистеина. Таков же механизм ингибирования пропиленимином. Наиболее окисленную селенитную форму ГП (ESe —ОН), возникающую при обработке Н2 О2 , ингибируют цианиды вследствие потери ферментом Se. ГП ингибируется при высокой ионной силе раствора. Особенно активны поливалентные анионы: фосфаты, сульфаты, малеаты [125,237], вероятно, вследствие нарушения электростатического взаимодействия GSH с остатками аргинина на втором этапе реакции [47]. Ионы Ag [237], Си ’, Hg2+, Zn2 + 2лИ Са ингибируют ГП. Механизм этого эффекта неясен, так как йодацетамид и N-малеимид не влияют на фермент [125,47]. Сильными и специфическими ингибиторами ГП, конкурентными к GSH, служат меркаптокарбоновые кислоты и третичные меркаптаны (меркаптосукцинат, пеницилламин и др.). Сильно ингибирует ГП и аурумтиоглюкоза. Длительное воздействие хлординитробензола разрушает ГП. Важно изучить влияние всех ингибиторов на три основные формы фермента: ESeH, ESeOH и ESeSG |