|
при ее повреждении микроорганизмом и его продуктами (Segal, Lewi, 1975). Вторая стадия под влиянием окислительной активности НАДФ-оксидазы, фермента, локализованного в лизосомах гранулоцита, НСТ восстанавливается в формазан (Park, 1971; Б.С. Нагоев, М.Г. Шубин, 1981; В.И. Покровский, Б.С. Нагоев, 1983). Доказано, что поглощение НСТ является эквивалентом поглощения микробных тел. Как микробный эндотоксин, так и НСТ, в присутствии ионов галоидов йода, брома, хлора активируют метаболизм в фагоците, вызывают «респираторный взрыв», который сопровождается увеличением потребления кислорода, активизацией гексозомонофосфатного шунта, возрастающим образованием перекиси водорода и свободных радикалов в нейтрофилах. Это далоФ основание считать НСТ тест показателем метаболической активности клеток, в частности нейтрофильных лейкоцитов и эквивалентом их фагоцитарной и бактерицидной активности (В.И. Покровский, Б.С. Нагоев, 1983; Д.Н. Маянский с соавт., 1985; Б.С. Нагоев, 1986; Stossel, 1976; Zakhiren с соавт., 1979). Кроме того, у НСТ-теста есть два главных достоинства. Во-первых, он выявляет компоненты, которые образуются только при стимуляции, а потому помогает в дифференциации покоящихся и активированных клеток (Б.С. Нагоев, М.Г. Шубич, 1981; Б.С. Нагоев, 1986; А.Н. Маянский, О.И. Пикуза, 1993). Вовторых, НСТ-тест отражает итоговую реакцию одного из ключевых ферментных каскадов, ответственных за эффекторный потенциал фагоцитов: нарушение способности к восстановлению НСТ совпадает с патологией кислородзависимых механизмов биоцидности (А.Н. Маянский, О.И. Пикуза, 1993). По данным Б.С. Нагоева и М.Г. Шубина (1981), Д.Н. Маянского с соавт. (1985) исследования на молекулярном уровне показали, что осуществление фагоцитоза в клетках обязано усилению метаболизма в фагоцитах, вследствие чего усиливается выделение кислородзависимых бактерицидных веществ: перекиси водорода (Н20 2) и гидроксильного радикала (ОН "); супероксидного аниона (02~) и синглетного аниона (02), которые вместе с галоидыми (I ”, Br“, С1 ") являются ведущими в антимикробном потенциале гранулоцитов. Другими словами, в присутствии антигена, подлежащего фагоцитозу, происходит активация стимулированных лейкоцитов с восстановлением НСТ. Отсюда НСТ-тест, основаный на прижизненном поглощении фагоцитами НСТ из |
позволяет выявить наличие «метаболического взрыва», возникающего в нейтрофильных гранулоцитах в процессе фагоцитоза, который сопровождается резким увеличением потребления кислорода, интенсификацией гексозомонофосфатного шунта и образованием-перекиси -водородав-этихклетках. Доказано, что поглощение НСТ адекватно поглощению микробных клеток г нейтрофилами. Процесс восстановления нейтрофильными гранулоцитами бесцветного нитросинего тетразолия в нерастворимый формазан темно-синего цвета состоит из двух взаимосвязанных стадий. Первая стадия собственно фагоцитоз НСТ, который зависит от состояния оболочки гранулоцита и повышается при ее повреждении микроорганизмом и его продуктами (Segal, Lewi, 1973). Вторая стадия под влиянием окислительной активности НАДФ-оксидазы, фермента, локализованного в лизосомах гранулоцита, НСТ восстанавливается в формазан (Park, 1971). Известно, что участие фагоцитов в удалении микроорганизмов, в основном, зависит от их способности к внутриклеточному перевариванию инфекционных агентов. А ведущими интралейкоцитарными микробицидными факторами фагоцитов являются пероксидозависимые системы. Биохимическим маркером активности пероксидазных систем является восстановление растворимого НСТ в нерастворимый темно-синий формазан (М.Г. Шубич, 1981). Другими словами, в присутствии антигена, подлежащего фагоцитозу, происходит активация стимулированных лейкоцитов с восстановлением НСТ. Поэтому НСТ-тест, основанный на прижизненном поглощении фагоцитами НСТ из среды и его последующим восстановлением внутри лейкоцита в диформазан, дает ценную информацию о функционировании одной из ключевых систем гранулоцитов, ответственной за их бактерицидный потенциал (Д.Н. Маянский с соавт, 1980; А.Н. Маянский, Д.Н. Маянский, 1983). Кроме того, с помощью НСТ-теста можно выявить энзиматические дефекты клеточного иммунитета. Nathan, 1968). исфагоцитозу (Quie, 1980; Bacher, НСТ-тест можно определять в двух вариантах: в спонтанном и стимулированном. Спонтанный проводят с интактными нейтрофилами, а стимулированный с клетками, предварительно стимулированными бактериальными |