|
нейтрофилы на 5 типов по степени ферментативной (ФАН): 0. Отсутствие активности: ядро и цитоплазма не окрашены, к этому типу следует также относить нейтрофилы с ограниченным участком желтой или светло-коричневой окраски в цитоплазме вблизи ядра или на периферии клетки. 1. Низкая активность: ядро не окрашено, вся цитоплазма диффузно окрашена в 9 светло-коричневый цвет. Возможно наличие светло-коричневой зернистости. Умеренная активность: ядро не окрашено, вся цитоплазма окрашена в коричневый цвет, возможно наличие единичных темно-коричневых гранул. 3. Высокая активность: ядро не окрашено, вся цитоплазма окрашена в темнокоричневый цвет. Возможно наличие гранул и участков потемнения. 4. Очень высокая активность: интенсивная темно-коричневая или чернокоричневая окраска цитоплазмы с массивным отложением азокрасителя в области ядра. Что можно объяснить диффузией продуктов реакции. Для количественной оценки активности НСТтеста с учетом метода Kaplow (1955) нами использован описанный В.И. Покровским и Б.С. Нагоевым (1983) принцип оценки реакции в лейкоцитах по интенсивности и насыщенности. Для этого по степени активности реакции все клетки подразделялись на 4 группы. В нулевую группу относили нейтрофилы без гранул; в первую группу включались клетки, содержащие единичные гранулы, или площадь окраски которых занимала до 25-35% цитоплазмы (I степень активности); во вторую группу —нейтрофилы, цитоплазма которых на 30-70 % была занята гранулами формазана (II степень активности) и в третью нейтрофилы, до 100 % заполненные гранулами независимо, контурпровались ядра или нет (III степень активности). Для определения показателя ФАН или других компонентов мазок при микроскопировании передвигают также, как при выведении лейкоцитарной формулы и подсчитывают 100 сегментоядерных нейтрофилов. При этом определяют число клеток, принадлежащих, в зависимости от активности фермента, к каждому из типов. Это число умножают на номер (фактор) типа. Сумма полученных произведений представляет собой показатель ФАН (химического компонента фермента). |
0. и количество окрашенного материала соответствует количеству исследуемого в клетке вещества или активности фермента. Так, на примере количественного определения ферментативной активности гидролитических ферментов фосфатаз картина распределения и количества осадка азокрасителя внутри клетки по Kaplow (1955) позволяет разделить сегментоядерные нейтрофилы на 5 типов по степени ферментативной активности (ФАН): Отсутствие активности: ядро и цитоплазма не окрашены, к этому типу следует также относить нейтрофилы с ограниченным участком желтой или светло-коричневой окраски в цитоплазме вблизи ядра или на периферии клетки. Низкая активность: ядро не окрашено, вся цитоплазма диффузно окрашена в светло-коричневый цвет. Возможно наличие светлокоричневой зернистости. 2. Умеренная активность: ядро не окрашено, вся цитоплазма окрашена 1. 3 4. в коричневый цвет, возможно наличие единичных темно-коричневых гранул. Высокая активность: ядро не окрашено, вся цитоплазма окрашена в темно-коричневый цвет. Возможно наличие гранул и участков потемнения. Очень высокая активность: интенсивная темно-коричневая или черно-коричневая окраска цитоплазмы с массивным отложением азокрасителя в области ядра. Что можно объяснить диффузией продуктов реакции. Для количественной оценки активности НСТ-теста с учетом метода Kaplow (1955) нами использован описанный В.И. Покровским и Б.С. Нагоевым (1983) принцип оценки реакции в лейкоцитах по интенсивности и насыщенности. Для этого по степени активности реакции все клетки подразделялись на 4 группы. В нулевую группу относили нейтрофилы гранул; в первую группу включались клетки содержащие единичные гранулы, или площадь окраски которых занимала до 25-35% цитоплазмы (I степень активности); во вторую группу —нейтрофилы, цитоплазма которых на 30-70 % была занята гранулами формазана (II степень активности) и в третью нейтрофилы, до 100 % заполненные гранулами независимо контурировались ядра или нет (III степень активности). ля еления показателя ФАН или других компонентов мазок при микроскопировании передвигают также, как при выведении лейкоцитарной формулы и подсчитывают 100 сегментоядерных нейтрофилов. При этом определяют число клеток, принадлежащих, в зависимости от активности фермента, к каждому из типов. Это число умножают на номер (фактор) типа. Сумма полученных произведений представляет собой показатель ФАН (химического компонента фермента). Показатель ФАН=1а+2Ь+Зс+4б (a, b, с, d количество клеток соответственно нулевого, 1-го, 2-го, 3-го и 4-го типов; см схему) Схема Примеры вычисления ФАН Типы активности Пример № 1 (нормальная ФАН) Пример № 2 (значительное увеличение ФАН) Число сегментированных нейтрофилов Произведение Число сегментированных нейтрофилов Произведение Нулевой 75 0 35 0 1-й 20 20 20 20 2-й 5 10 30 60 3-й 0 0 10 30 4-й 0 0 5 20 Показатель ФАН 30 130 Таким образом, показатель ФАН является увеличенной в 100 раз средней величиной активности фермента или какого-либо другого вещества в одном сегментоядерном нейтрофиле, выраженной в условных единицах (баллах оценки). Увеличение средней величины дает удобную возможность оперировать целыми характера единицы оценки, не приводит погрешности. Процентное содержание положительно реагирующих клеток определяется простым вычитанием из 100 сосчитанных клеток количества клеток, в которых реакция отсутствовала. В примере №1 с нормальной ФАН количество положительно реагирующих составляет 25%, а в примере №2, со значительным увеличением, 65 %. Однако только процентное содержание положительно реагирующих клеток слабо |