Определение липидного спектра плазмы крови. Определение концентрации общего холестерина, триглицеридов и ХС ЛПВП сыворотки венозной крови, взятой утром после 12-часового голодания, проводили энзиматическим методом на химической анализатороной системе FP-900 фирмы «Labsistems» (Финляндия). Уровень ХС ЛПНП рассчитывали по формуле W. Friedewald и соавт. (1972) в модификации Dahlen G-Н.и соавт. (1986): ХС ЛПНП=ОХС (ХС ЛПВП + ТГ/2,2). Коэффициент атерогенности рассчитывали общепринятым способом по Климову А.Н. (1995). Уровень эндотелина-1 (ЭТ-1)определяли иммуноферментным методом на тест-системах фирмы «Biomedica» (Австрия), разработанных для анализа ЭТ-1 в биологической жидкости. Метод основан на способности эндотелина связываться с детектирующими антителами, образуя «сэндвичевый» комплекс. Комплекс пероксидазы с антителами обнаруживает связанные антитела. После удаления несвязавшегося конъюгата вносится ферментный субстрат ТМБ. Интенсивность окраски прямо пропорциональна содержанию эндотелина-1 [25, 27, 31]. Определение вазорегулирующей функции эндотелия сосудов. Вазорегулирующую функцию эндотелия изучали методом визуализации просвета плечевой артерии с помощью ультразвука высокого разрешения с использованием методики, описанной Celermayer D.S. etal. в модификации Stadler A. etal. [27, 61]. Исследование осуществлялось на аппарате «Vivid-З» (Англия). Для измерения диаметра сосуда использовались линейные датчики 7,5 МГц, которые располагались на фиксированном участке верхней или нижней конечности, что позволяло оценить диаметр сосуда с точностью до О,1-0,2 мм. Диаметр сосуда определяли как расстояние между проксимальным и дистальным по отношению к датчику допплеровским сигналом. Объёмные показатели кровотока с помощью соответствующих формул рассчитывались, исходя из диаметра артерий и скорости кровотока. Стимулом, вызывающим эндотелийзависимую дилатацию периферических артерий, являлась реактивная гиперемия за счет устранения созданного |
аппарате «Vivid-З» (Англия) в М-режиме по стандартному протоколу в положении лежа на спине с приподнятым на 30° головным концом или на левом боку по методике, предложенной Американской Ассоциацией кардиологов (1981) с одновременной записью ЭКГ. По данным эхокардиографии рассчитывали конечно-систолический и конечнодиастолический размеры (КСР и КДР) и объемы (КСО и КДО) левого желудочка, фракцию выброса (ФВ), ударный объем (УО) и фракцию систолического укорочения передне-заднего размера левого желудочка (%ds), общее периферическое сосудистое сопротивление, массу миокарда левого желудочка (ММЛЖ) в граммах определяли согласно формуле R. Devereux и соавт. (1984). Индекс массы миокарда левого желудочка (ИММЛЖ) рассчитывали как соотношение ММЛЖ к росту испытуемого во 2-й степени и выражали в г/м . Гипертрофию левого желудочка диагностировали при увеличении толщины межжелудочковой перегородки и задней стенки левого желудочка в конце диастолы более 1,1 см при значениях ИММЛЖ равных или превышающих для мужчин 118 г/м . Определение вазорегулирующей функции эндотелия сосудов. Вазорегулирующую функцию эндотелия изучали методом визуализации просвета плечевой артерии с помощью ультразвука высокого разрешения с использованием методики, описанной Celermayer D.S. et al. в модификации Stadler A. et al. [14, 35]. Исследование осуществлялось на аппарате «Vivid-З» (Англия). Для измерения диаметра сосуда использовались линейные датчики 7,5 МГц, которые располагались на фиксированном участке верхней или нижней конечности, что позволяло оценить диаметр сосуда с точностью до 0,1-0,2 мм. Диаметр сосуда определяли как расстояние между проксимальным и дистальным по отношению к датчику допплеровским сигналом. Объёмные показатели кровотока с помощью соответствующих формул рассчитывались, исходя из диаметра артерий и скорости кровотока. Стимулом, вызывающим эндотелийзависимую дилатацию периферических артерий, являлась реактивная гиперемия за счет устранения 0,33 и Сп/ИРИ ниже 0,23. Для расчета второго индекса переводили концентрацию в нг/мл. Считается, что первое соотношение характеризует уровень соответствия секреции инсулина гликемии в данный конкретный момент, а второе отражает величину клиренса инсулина печенью. Определение липидного спектра плазмы крови. Определение концентрации общего холестерина, триглицеридов и ХС ЛПВП сыворотки венозной крови, взятой утром после 12-часового голодания, проводили энзиматическим методом на химической анализатороной системе FP-900 фирмы «Labsistems» (Финляндия). Уровень ХС ЛПНГ1 рассчитывали по формуле W.Friedewald и соавт. (1972) в модификации Dahlen G.H.h соавт. (1986): ХС ЛПНП=ОХС-(ХС ЛПВП + ТГ/2,2). Коэффициент атерогенности рассчитывали общепринятым способом по Климову А.Н. (1995). Методика определения микроальбуминурии. Для количественного определения альбумина в моче был использован иммуноферментный метод, основанный на принципе конкурентного твердофазного ИФА-ELISA, в ходе которого проходят конкурентная реакция и ферментная цветная реакция [142, 233]. Оптическая плотность определяется в биохроматическом режиме при 450 нм с фильтром сравнения 600-690 нм. Расчет производится с использованием 4-параметрической регрессии с линейно-логарифмическими координатами для оптической плотности и концентрации. Уровень эндотелина-1 (ЭТ-1) определяли иммуноферментным методом на тест-системах фирмы «Biomedica» (Австрия), разработанных для анализа ЭТ-1 в биологической жидкости. Метод основан на способности эндотелина связываться с детектирующими антителами, образуя «сэндвичевый» комплекс. Комплекс пероксидазы с антителами обнаруживает связанные антитела. После удаления несвязавшегося конъюгата вносится ферментный субстрат ТМБ. Интенсивность окраски прямо пропорциональна содержанию эндотелина-1 [15,219]. Определение фактора Виллебранда. Определение уровня фактора Виллебранда в плазме крови проводилось на лазерном анализаторе агрегации |