Проверяемый текст
Макеева Екатерина Александровна. Развитие околоушной слюнной железы, путей ее иннервации и кровоснабжения (Диссертация 2010)
[стр. 28]

28 Для выявления муцинов препараты окрашивали муцикармином и альциановым синим рН 2,5, а также альциановым синим рН 2,5 ШИК реакция (PAS).
При окраске муцикармином происходит выявление мукополисахаридов эпителиального происхождения (муцинов).

В результате окраски мукополисахариды имели цвет от темнорозового до красного цвет, ядра сине-фиолетовый, остальные структуры прокрашивались в бледно-желтый цвет.
Альциановый синий рН 2,5 использывали для выявления кислых мукополисахаридов.
В результаты кислые мукополисахариды окрашивались в бирюзово-голубой цвет, ядра в красный.
Интегрированный метод выявления кислых и нейтральных мукополисахаридов и углеводов в тканевых образцах проводится в два этапа.

Для этого использывали окраску альциановым синим рН 2,5 ШИК реакция (PAS).
В первой части процедуры окрашивания срезы обрабатываются альциановым синим, что приводит к окрашиванию кислыхмукополисахаридов с формированием нерастворимого синего пигмента Монастраля,.

Затем проводится ШИК-реакция с окрашиванием нейтральныхмукополисахаридов и гликогена.

В результате ШИК-положительные вещества окрашиваются в ярко-красный цвет, кислые мукополисахариды в бирюзовоголубой,
некоторые эпителиальные мукополисахариды и хрящ — от пурпурного до темно-синего.
Распределение материала по срокам эмбрионального развития и методам исследования
представлены в таблице 1.
Таблица 1.
[стр. 43]

2.4.
Методы исследования, использованные для ферментативной железы активности клеток околоушной изучения слюнной Выявление ферментов в клетках околоушной слюнной железы проводили у эмбрионов 18-20-ого дней, у новорожденных крысят на 1 и 2 сутки после рождения, а также у половозрелых крыс.
Окраску срезов проводили готовыми стандартными наборами красителей производства компании Биовитрум.
Для выявления муцинов препараты окрашивали муцикармином и альциановым синим рН 2,5, а также альциановым синим рН 2,5 ШИК реакция (PAS).
При окраске муцикармином происходит выявление мукополисахаридов эпителиального происхождения (муцинов).

Муцикармин обладает относительной специфичностью муцины фибробластов окрашиваются в очень небольшой степени.
Существует мнение, что краситель реагирует с глюцидной частью мукопо л исахарид ов.
В наборе содержатся следующие реактивы: А.
Гематоксилин Майера, 30 мл В.Муцикармин Майера, 30 мл С.
Раствор Метанилового желтого, 30 мл Окраску производили в следующем порядке: 1.
срезы помещали в дистиллированную воду.
2.
на срез наносили 10 капель реактива А, оставляли на 5 мин.
3.
промывали срезы в дистиллированной воде.
4.
подсинивали образцы в проточной воде в течение 5 мин.
43

[стр.,46]

G.Гематоксилин Майера, 30 мл Интегрированный метод выявления кислых и нейтральных мукополисахаридов и углеводов в тканевых образцах проводится в два этапа.
В первой части процедуры окрашивания срезы обрабатываются альциановым синим, что приводит к окрашиванию кислых мукополисахаридов с формированием нерастворимого синего пигмента Монастраля,
стабильного при дальнейшей обработке во второй половине процесса.
Затем проводится ШИКреакция с окрашиванием нейтральных мукополисахаридов и гликогена
(окрашивание гликогена произойдет только при отсутствии предварительной ферментной обработки препарата).
1.
Помещали срезы в дистиллированную воду.
2.
Наносили на срез 10 капель реактива А, оставляли на 30 мин.
3.
Промывали срезы в дистиллированной воде, наносили на них 15 капель реактива В, оставляли наЮ мин.
4.
Промывали под проточной водой 5 мин, затем в дистиллированной воде в течение 2 мин.
5.
Наносили на срезы 10 капель реактива С, оставляли на 10 мин.
6.
Промывали в дистиллированной воде.
7.
Наносили 10 капель реактива D, оставляли на 20 мин.
8.
Промывали срезы в дистиллированной воде.
9.
Наносили на срезы 10 капель реактива Е, оставляли на 2 мин.
10.
Сливали избыток реагента и наносии на срез 10 капель реактива F, оставляли на 3 мин.
46

[стр.,47]

11.
Промывали срезы в дистиллированной воде.
12.
Наносили на срезы 10 капель реактива G, оставляли на 2 мин.
13.
Подсинивали образцы под проточной водой в течение 5 мин.
14.
Дегидрировали в спиртах возрастающей концентрации, просветляли в ксилоле и заключали под покровное стекло.
Таблица 1.
Распределение материала по срокам эмбрионального развития и методам исследования
s с.
о ч ч сз X S го X S Фосфовольфрамовый гематоксилин о m S е и •х о о с н ч о s са i ч я п О) О.
•Л S о.
« я я я а я я я >> X U ЗЯ и ва о а.
14 15 16 17 18 19 20 21 Новорожд.
Полово-зрел.
Всего и о о Н S о U ч S о С а сз п.
О 5 5 5 5 5 5 5 5 •л.
S 3 X о я я я Л Лльциановый синий рН 2,5 ШИК-реакция (PAS) 5 5 5 5 20 Импрегнация серебром по Бильшовскому о о L.
и ВО 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 И 5 ч < 25 25 25 25 25 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 20 25 40 40 15 15 260 40 40 40 40 40 20 В результате ШИК-положительные вещества окрашиваются в ярко-красный цвет, кислые мукополисахариды в бирюзово 47

[Back]