($Ытас1а Т., Уатагак1 Н., М1тига М. е1 а1, 1994; Огбг с!е МотеИапо Р.К., 2005). По химической структуре цитохром Р-450 является гемопротеином. В восстановленной форме он связывает монооксид углерода с образованием комплекса с максимальным поглощением света при длине волны 450 нм. Впервые цитохром Р-450 был выделен в 1961 году, и в начале 1960-х гг. считался одним ферментом, в середине 1960-х гг. он стал ассоциироваться с метаболизмом гормонов ми лекарственных средств. В 1970-х гг. было высказано предположение, что имеется как минимум 6 различных видов данного фермента, однако в связи с его гидрофобной природой и ассоциированностью с мембранами было невозможно выделить чистый фермент. Успехи в очистке мРНК в начале 1980-х гг. позволили Оопга1ег е! а1. выделить первую кДНК, кодирующую целиком молекулу цитохрома Р450 (Оопга1ег Р.Л., МсКепгю Р.1., Кппига 8. е1.а1, 1984). Результаты последующих клонирований данного гена позволили выделить множество изоформ данного фермента. Сравнение последовательностей нуклеотидов в генах цитохрома Р-450 у человека и бактерии показало их высокую схожесть, что свидетельствует о происхождении данных генов от общего гена более 3 миллиардов лет назад (ЫеЬег1 П.\У., Ас1е$тк М., Сооп МЛ. е1 а1., 1987). В геме цитохрома Р-450 железо связано с атомами азота четырех лигандов (с образованием порфиринового кольца), а также с атомом азота гистидина и атомом серы цистеина, входящими в состав полипептидной цепи белковой части цитохрома Р-450. Важнейшее свойство цитохрома Р-450 участие в метаболизме практически всех известных химических соединений, при этом основной гидроксилирование (включение одного атома кислорода в субстрат, другого в молекулу воды, поэтому эти ферменты называются монооксигеназами). Цитохром Р-450 имеет множество различных изоформ, называемых изоферментами. Изоферменты цитохрома Р-450 классифицируются по идентичности аминокислотного состава на 17 семейств (идентичность >40%), 20 |
23 ния или ингибирования соответствующих генов, ответственных за синтез данного фермента, или в результате врожденной измененной активности данного гена) или прямая инактивация, имеющихся в клетках ферментов путем воздействия экзогенных или эндогенных соединений. Следовательно, возможно сознательное влияние на метаболизм лекарственных препаратов с целью изменения степени выраженности их фармакологических и/или токсикологических эффектов (Кукес В.Г., Сычев Д.А., Раменская Г.В. и др., 2004). 1.3 Цитохром Р-450 основа первой фазы .метаболизма Цитохром Р-450 представляет собой группу ферментов, осуществляющих метаболизм лекарственных средств и других ксенобиотиков, а также участвующий в синтезе стероидных гормонов, холестерина. Желчных кислот, простаноидов (громбоксана Аг, простациклина Ь). По химической структуре цитохром Р-450 является гемопротеином, В восстановленной форме он связывает монооксид углерода с образованием комплекса с максимальным поглощением света при длине волны 450 нм. Впервые цитохром Р-450 был выделен в 1961 году, и в начале 1960-х гг. считался одним ферментом, в середине 1960-х гг. он стал ассоциироваться с метаболизмом гормонов ми лекарственных средств. В 1970-х гг. было высказано предположение, что имеется как минимум 6 различных видов данного фермента, однако в связи с его гидрофобной природой и ассоциированностью с мембранами было невозможно выделить чистый фермент. Успехи в очистке мРНК в начале 1980-х гг. позволили Ооп2а1е2 еч а1. выделить первую кДНК, кодирующую целиком молекулу цитохрома Р-450 (Оопгакг РЖ, МсКеп21е Р.1., Ктшга 8. еРа1, 1984). Результаты последующих клонирований данного гена позволили выделить множество изоформ данного фермента. Сравнение последовательностей нуклеотидов в генах цитохрома Р-450 у человека и бактерии показало их высокую схожесть, что свидетельствует о происхождении данных генов от общего гена более 3 миллиардов лег назад (N06011 ЭЛУ., Ооп2а1е2 РЖ, 1987). В геме цитохрома Р-450 железо связано с атомами азота четырех лигандов (с образованием порфиринового кольца), а также с аго 2 А мом азота гистидина и атомом серы цистеина, входящими в состав полипептидной цепи белковой части цитохрома Р-450. Наибольшее количество цитохрома Р-450 обнаружено в гепатоцитах. Его изоформы находятся также в кишечнике, легких, почках, надпочечниках, головном мозге, коже, плаценте, миокарде (Ееичз О.РЛУ., Оюктз М., ЕббегзЬачу РЛ. е1 а1., 1999). Важнейшее свойство цитохрома Р-450 участие в метаболизме практически всех известных химических соединений, при этом основной гидроксилирование (включение одного атома кислорода в субстрат, другого в молекулу воды, поэтому эти ферменты называются монооксигеназами). Цитохром Р-450 имеет множество изоформ изоферменгов. По классификации О. ИеЬеП (1987) изоферменты цитохрома Р-450 подразделяют по идентичности аминокислотного состава на 17 семейств (идентичность >40%), а последние на 39 подсемейств (идентичность более 55%). Семейства обозначаются римскими цифрами, а подсемейства -латинскими буквами. Изоферменты цитохрома Р-450 различаются субстратной специфичностью и регуляторами их активности (индукторами и ингибиторами). В метаболизме лекарственных средств принимают участие изоферменты семейств 1, II, III, из них основные 1А1, 1А2, 2А6, 2В6, 206, 2С9, 2С19, 2Е1, ЗА4. (Ье\У18 О.РЛУ., Оюктз М., Ес]с1егзЬа\у Р.Т е! ак, 1999) Содержание различных изоферментов в печени человека и их участие в окислении лекарственных средств различны (табл.З) Таблица 3. Содержание различных изоферментов цитохрома Р-450 печени человека и их вклад в метаболизм лекарств. Изофермент цитохрома Р450 Содержание в печени, % Участие в метаболизме лекарств, % 1 2 3 СУР1А1 <1 2,5 СУР1А2 13 8,2 СУР1В1 <1 Данные не обнаружены |