препараты вводили внутримышечно, в терапевтических дозах по следующей схеме: 1-й группе с 1-го по 6-й день беременности (доипмлантационный период); 2-й группе с 6-го по 16-й день беременности (органогенез); 3-й группе с 16-го по 19-й день беременности (фетогенез). Крысам контрольной группы в эти же сроки вводили физиологический раствор натрия хлорида. Отмечали наступление родов, характер их течения, численность помета, массу тела и длину плодов. Отмечали день появления шерстного покрова у крысят, отлипания ушных раковин, прорезания резцов, открытия глаз. А также исследовали эмоционально-двигательное поведение, способности тонкой координации методом переворачивания в воздухе с последующим вставанием на четыре лапы. Метод заключается в том, что животных брали одной рукой в области холки, а другой за хвост, поднимали на высоту 60 см над поролоновой подложкой, переворачивали вверх животом и отпускали. Учитывалось положение приземления крысы. Животное должно перевернуться и упасть на все четыре лапы одновременно. 3.3. Определение влияния препаратов седимин-Ре+ и седимнн-8е+ на уровень трийодтиронина (ТЗ) и тироксина (Т4) в крови лабораторных животных и морфологию щитовидной железы В качестве объектов исследования выступали белые крысы, обоего пола, массой тела 180-200 г. Для этого по принципу аналогов формировались 3 группы животных по 10 голов в каждой. Первые 2 группы были опытными, которым в терапевтических седимин-Ре+ и седимин-8е+ дозах вводились исследуемые вводили внутримышечно, препараты. с двукратно интервалом 10 дней. Третья группа служила контролем, животным которой применяли изотонический раствор натрия хлорида. Наблюдение за животными вели в течение всего периода исследований 41 |
2.1.1.7.1. Определение эмбриои фетотоксического действия Ферранимала-75 с кобальтом Под эмбриотоксическими свойствами понимают способность того или иного вещества оказывать токсическое действие на развивающиеся зародыши. Эмбриотоксичность может проявляться как в повышении уровня эмбриональной смертности (эмбриолетальное действие), так и в виде анатомических, гистологических, цитологических, биохимических, нейрофизиологических отклонений от нормы, проявляющихся до или после рождения (тератогенное действие). Кроме того, эмбриои фетотоксичность может проявляться в изменении массы тела, краниокаудального размера плодов, задержке оссификации скелета (общая задержка развития), увеличении перинатальной смертности. Объектом исследования служили белые, половозрелые, беременные крысы, массой 200±10 г, находящиеся на обычном режиме вивария. Животные были сформированы в 4 группы по 14 крыс в каждой. Первые три группы были опытными, четвертая служила контролем. Каждая группа, была разделена на две подгруппы, в зависимости от вводимой дозы препарата. Для спаривания самцов подсаживали к самкам в соотношении 1:3. Первым днем беременности считали день обнаружения сперматозоидов в вагинальном мазке. Исследуемый препарат вводили внутримышечно, один раз в сутки, в дозах 75 и 150 мг/кг массы тела. С учетом того, что чувствительность вводили по следующей схеме: 1-й группе с 1-го по 6-й день беременности (доипмлантационный период); 2-й группе с 6-го по 16-й день беременности (органогенез); 3-й группе с 16-го по 19-й день беременности (фетогенез). эмбриона к токсическому действию фармакологических веществ зависит от стадии развития, препарат 44 кишку, внутренние половые органы. Обращали внимание на почки (возможность гидронефроза), матку с придатками и тестикулы. Окрашивание скелета ализарином (методика Доусона, модифицированная в отделе эмбриологии НИИЭМ АМН СССР). Плоды фиксировали в 96° этаноле не менее 10 дней. Объем спирт превышал объем фиксируемых плодов в 10 раз. После фиксации у плодов удаляли внутренности и погружали в 1 % раствор КОН для просветления мягких тканей. Время пребывания плодов в этом растворе определяли эмпирически (примерно 1—2 суток). Когда становились видны закладки костей, плоды вынимали, промывали водопроводной водой и переносили их в раствор А (150 мл глицерина, 300 мл дистиллированной воды и 10 г КОН), к которому добавляли несколько капель раствора Б (1 % раствор ализарина красного) до появления светло-фиолетового окрашивания. Через 3—5 суток окостеневшие участки скелета окрашивались в красно-фиолетовый цвет. Для обесцвечивания мягких тканей плоды переносили в раствор А на 7-14 дней, затем их проводили через смеси глицерина, спирта и воды с целью обезвоживания (1:2:7. 2:2:6, 4:4:2, равные части спирта и глицерина, чистый глицерин с добавлением 1—2 капель формалина). В чистом глицерине плоды хранились. Плоды изучали под лупой, учитывали аномалии скелета, количество точек окостенения в различных костных образованиях. 2.1.1.7.2. Определение влияния Ферранимала-75 с кобальтом на постнатальное развитие крысят Опыты проводили на белых крысах и полученных от них крысятах. Для этого формировали 4 группы самок, по 10 животных в каждой, и обрабатывали препаратом по той же схеме, как при изучении эмбриотоксичности. Отмечали наступление родов, характер их течения, численность помета, массу тела и длину плодов. Отмечали день появления шерстного покрова у крысят, отлипания ушных раковин, прорезания резцов, открытия 47 глаз. А также исследовали эмоционально-двигательное поведение, способности тонкой координации методом переворачивания в воздухе с последующим вставанием на четыре лапы. Метод заключается в том, что животных брали одной рукой в области холки, а другой за хвост, поднимали на высоту 60 см над поролоновой подложкой, переворачивали вверх животом и отпускали. все четыре лапы одновременно. 2.1.1.8. Определение влияния на антитоксическую функцию печени крыс Печень играет важную роль во многих видах обмена веществ (белковом, углеводном, липидном, и др.), в процессах свертывания крови, осуществляет обезвреживающую и выделительные функции. Метаболизируя токсические химические соединения, клетки печени становятся мишенью действия, как самих веществ, так и их еще более реакционноспособных метаболитов. Влияние новых железодекстрановых препаратов на антитоксическую функцию печени изучали по методике Д.Г. Розина (1964). В основе данной методики лежит способность различных химических веществ влиять на продолжительность гексеыалового сна лабораторных животных, а как известно, гексенал метаболизируется в печени. Для проведения опыта, по принципу аналогов, формировали группы подопытных животных белых крыс по 10 голов в группе, которым вводили исследуемые препараты в дозах 75 и 300 мг/кг, животным контрольной группы вводили изотонический раствор натрия хлорида. Раствор гексенала готовили ex tempore и инъецировали внутрибрюшинно в дозе 60 мг/кг, одновременно животным опытных и контрольной групп. Гексенал инъецировали через 1, 3, 5 и 24 часа после введения животным исследуемых железодекстрановых препаратов. 48 Учитывалось положение приземления крысы. Животное должно перевернуться и упасть на |