Проверяемый текст
Василенко, Людмила Николаевна; Клинико-морфологические особенности лейомиомы матки с быстрым ростом узлов у женщин репродуктивного возраста (Диссертация 2010)
[стр. 31]

Использование каждого вида антител сопровождалось постановкой контрольных реакций на серийных срезах.
Иммуноморфологическую оценку препарата начинали с просмотра негативного контроля.
В случае отсутствия окрашивания, в том числе и фонового, приступали к анализу исследуемого материала.
Таблица 2 Панель антител, использованная в иммуногистохимическом исследовании Искомый антиген Клон антител Рабочее
разнедение Фирма изготоI витель Ki67 MIB-1 Готовые к использованию (без разведения, ready to use) “DAK.O”, Дания а-рецепторы к эстрогену 1D5 Готовые к использованию (без разведения, ready to use) “DAKO”, Дания Рецепторы к прогестерону клон PgR 636 Готовые к использованию (без разведения, ready to use) “DAKO”, Дания При иммуногистохимическом исследовании для оценки экспрессии рецепторов определяли индекс экспрессии (ИЭ) иммунореактивный счет (immunoreactiva score, IRS) согласно рекомендациям, уже устоявшимся в практике исследований (Remmele W.
et al., 1986; Torgsten G.
et al., 2009): ИЭ= процент позитивных клеток х интенсивность реакции Процент позитивных клеток для расчета индекса оценивали нолуколичествснно: нет метки 0, 1-9% позитивных клеток I, 10-50% позитивных клеток 2, 51-80% позитивных клеток 3, более 80% позитивных клеток 4.
Интенсивность окраски полуколичественно определяли следующим образом: 0нет реакции, 1 слабая (светло-коричневое окрашивание метки), 2 умеренная (коричневое окрашивание метки), 3 выраженная (темнокоричневое окрашивание метки).
[стр. 38]

использовании цитратного буфера (рН=6,0).
После отмывки в буфере наносили пероксидазный блок в течение 5 минут.
По окончании инкубации и отмывок в буфере на препарат наносили блокирующий неспецифическое связывание протеин-блок, а затем моноклональные антитела (инкубация с антителами в течение 40 минут при t = 37°С).
После окончания инкубации препараты тщательно отмывали с трис-буфере (рН=7,2-7,4), обрабатывали вторичными биотинилированными антителами и затем комплексом стрептавидинпероксидаза (каждый этап 20 мин при t = 37°С), входивших в*систему детекции: После тщательной отмывки трис-буфером срезы обрабатывали хромогенным субстратом (3,3 диаминобензидин в буферном растворе).
Препараты докрашивали гематоксилином Майера в течение 30 секунд.
Затем препараты дегидратировали в спиртах, осветляли в 2 объемах ксилола, и заключали в монтирующую среду (Shandon Mount, США) под покровное стекло.
Использование каждого вида антител сопровождалось постановкой контрольных реакций на серийных срезах.
Иммуноморфологическую оценку препарата начинали с просмотра негативного контроля.
В случае отсутствия окрашивания, в том числе и фонового, приступали к анализу исследуемого материала.
Таблица 2 Панель антител, использованная'в иммуногистохимическом исследовании Искомый антиген Клон антител Рабочее
разведение Фирма изготовитель Ki67 MIB-1 Готовые к использованию (без разведения, ready to use) “DAKO”, Дания а-рецепторы к эстрогену 1D5 Готовые к использованию (без разведения, ready to use) “DAKO”, Дания Рецепторы к прогестерону клон PgR 636 Готовые к использованию (без разведения, ready to use) “DAKO”, Дания

[Back]