|
группы выстригали волосяной покров на участке кожи размером 6*4 см, наносили аппликации цефаметрина по 0,5 мл на один и тот же участок каждые в течение 4 дней. Кроликов второй группы сенсибилизировали многократными аппликациям лошадиной сыворотки по 0,5 мл на один и тот же участок кожи размером 6*4 см 4 дня подряд. На седьмой день провели капельные пробы: в опытной группе цефаметрином, в контрольной лошадиной сывороткой. Учет реакции проводили через 24 часа, на 8,9, 10 сутки. О раздражающем действии судили по развитию выраженного дерматита в местах капельных проб. В результате, у двух животных контрольной группы на 8 сутки, на месте капельной пробы наблюдали гиперергическую реакцию организма: отек кожи и инфильтрацию при наличии эритемы. На второй день реакция ослабевала. У животных опытной группы видимых реакций кожи не наблюдали. 3.7.5. Фармакологические свойства цефаметрина Изучение фармакологического действия цефаметрина включало определение антимикробных свойств методом серийных разбавлений в жидкой питательной среде и методом диффузии в агар . При определении бактерицидной активности цефаметрина в жидкой питательной среде делали его дробные (кратные) разведения в МПБ. В качестве тест культур использовали суточные полевые микроорганизмы выделенные от коров, больных острым послеродовым эндометритом (Streptococcus, Staphylococcus, Escherichia, Proteus) В бульон, содержащий препарат в убывающей концентрации (разведение 1: 128) вносили тест-культуры. Микробная нагрузка составляла 1 млрд. микробных тел в 1 мл. пробирки с питательной средой инкубировали в течении 1820 часов при температуре 37 градусов С. Активность препарата определяли по ингибиции интенсивности роста и гибели микроорганизмов. 143 |
Оценку местного раздражающего действия цефаметрина осуществляли на 6 кроликах массой 2,2-3,2 кг методом многократных накожных аппликаций. Для проведения опыта сформировали 2 группы кроликов по три животных в каждой. В первой группе кроликов использовали (п=12) аппликации цефаметрина по 0,1 мл на один и тот же участок кожи размером 4*6 см ежедневно в течение 4 дней. На седьмой день провели капельные пробы: в опытной группе — цефаметрином, в контрольной — лошадиной сывороткой. Учет реакции проводили через 24 часа, на 8, 9, 10 сутки. О раздражающем действии судили по развитию выраженного дерматита в местах капельных проб. Общетоксическое действие препарата оценивали, определяя острую и хроническую токсичности в соответствии с « Методическими указаниями по определению токсичных свойств препаратов, применяемых в ветеринарии и животноводстве» (1991), утвержденными ГУВ СССР и « Методическими рекомендациями по токсикоэкологической оценке лекарственных средств, применяемых в ветеринарии», одобренных секцией отделения ветеринарной медицины РАСХН (1998). Острую токсичность цефаметрина определяли на белых крысах массой 100120 г по методу Deichmann, и Le Blanc (И.В. Саноцкий, 1970). Опыт проводили на восьми крысах. Каждую дозу подбирали так, чтобы последующая отличалась от предыдущей в 1,5 раза. Цефаметрин вводили внутрижелудочно через зонд, после чего за животными вели ежедневные наблюдения в течение 10 дней, отмечая время наступления гибели. За LD50 принимали промежуточную дозу препарата между наименьшей летальной и наибольшей переносимой. Параметры хронической токсичности определяли на 60 белых крысахсамцах массой 140-200 г. разбитых на две группы: опытную и контрольную по 30 голов в каждой, подобранных по методу пар-аналогов, используя тест «субхронической токсичности» R.K. Lim с соавт. (И.В. Саноцкий, 1970). Препарат задавали ежедневно в течение 20 дней, внутрижелудочно в различных дозах по схеме. В контрольной группе животным вводили стерильный физраствор, в опытнойцефаметрин, установив первоначальную дозу (0,1 от LD50), увеличивая ее через каждые 4 38 Кроликов второй группы сенсибилизировали многократными аппликациям лошадиной сыворотки по 0,5 мл на один и тот же участок кожи размером 6*4 см 4 дня подряд. На седьмой день провели капельные пробы: в опытной группе цефаметрином, в контрольной лошадиной сывороткой. Учет реакции проводили через 24 часа, на 8, 9, 10 сутки. О раздражающем действии судили по развитию выраженного дерматита в местах капельных проб. В результате, у двух животных контрольной группы на 8 сутки, на месте капельной пробы наблюдали гиперергическую реакцию организма: отек кожи и инфильтрацию при наличии эритемы. На второй день реакция ослабевала. У животных опытной группы видимых реакций кожи не наблюдали. 3.1.2 Изучение стабильности препарата цефаметрин Таблица 7 Результаты изучения стабильности препарата цефаметрин Характеристика Показатель Внешний вид и цвет Запах Концентрация водородных ионов На протяжении всего периода исследований цефаметрин сохранял цвет и внешний вид зеленый раствор, специфический приятный запах алоэ, рН в пределах 7,9 8,1. 7,9-8,1 8,0 8,0 8,0 8,0 8,0 8,0 (норма) Раствор зеленого цвета Специфический запах алоэ + + + + + + + + + + + + Исследовано на месяце хранения 1 2 3 4 5 6 56 молока, свободного от антибиотиков, 1 мл метиленового голубого и от 3 до 4 капель термофильного стрептококка. Содержимое пробирок размешивали и стави-, ли на 5,5 ч в водяную баню при температуре от 38 до 40 °С. При наличии антибиотика молоко имело бы синий цвет. Во всех пробах обнаруживали обесцвечивание метиленового голубого, что свидетельствовало об отсутствии антибиотика в молоке. 3.2. Результаты экспериментальных исследований по определению специфического действия препарата цефаметрин 3.2.1. Определение антимикробной активности Определение антимикробных свойств цефаметрина проводили методом серийных разбавлений в жидкой питательной среде и методом диффузии в агар. При определении бактерицидной активности цефаметрина в жидкой питательной среде делали его дробные (кратные) разведения в МПБ. В качестве тест культур использовали суточные полевые микроорганизмы выделенные от коров, больных острым послеродовым эндометритом (Streptococcus, Staphylococcus, Escherichia, Proteus) В бульон, содержащий препарат в убывающей концентрации (разведение 1: 128) вносили тест-культуры. Микробная нагрузка составляла 1 млрд. микробных тел в 1 мл. пробирки с питательной средой инкубировали в течении 18-20 часов при температуре 37 градусов С. Активность препарата определяли по ингибиции интенсивности роста и гибели микроорганизмов. 58 |