|
по Романовскому-Гимза мазках крови). Биохимические исследования состояли из определения в сыворотке крови общего белка (колориметрически), белковых фракций (нефелометрически), мочевины (цветной реакцией с диацетилмонооксимом и тиосемикарбазидом), общего кальция (с орто-кризолфталеином), неорганического фосфора (с ванадат-молибдатным реактивом), глюкозы (ферментативно). Для определения факторов резистентности использовали тест бактериального фагоцитоза нейтрофилов с учетом степени его завершенности по отношению к бактериям по И.В. Нестеровой с соавт. (1996). Бактерицидную активность сыворотки крови (БАСК) определяли по О.В. Смирновой и Т.А. Кузьминой (1966), лизоцим-ную (ЛАСК) по Д.Г. Дорофейчук, Т-, В-, МК-лимфоциты методом Пирса в модификации Н.Н. Гугушвили с соавт. (2000) с прочным синим и нафтил ацетатом. Для микробиологических исследований маточные истечения получали по методике Н.Н. Михайлова, М.А. Лучко и З.С. Конновой (1967). С целью определения состава микрофлоры матки осуществляли посев полученного материала на МПА, МПБ, кровяной агар, МПА , среды Эндо, Сабуро и др. Идентификацию изолированных микроорганизмов проводили с учетом их морфологических, культуральных свойств по общепринятым методикам. Для определения вида бактерий использовали пластины биохимические дифференцирующие энтеробактерии и стафилококки научно-производственного объединения «Диагностические системы», г. Нижний Новгород, углеводные среды Гиса. Видовую принадлежность бактерии устанавливали, руководствуясь «Определителем бактерий» Берги (1980) и рекомендациями Н.Н. Михайлова (1983), В.М. Карташовой с соавт. (1988), а грибов «Определителем патогенных, токсигенных и вредных для человека грибов» (1979) и также «Атласом грибов патогенных для сельскохозяйственных животных и птиц» (1953). Патогенность микроорганизмов изучали путем внутрибрюшного заражения белых мышей одномиллиардной взвесью смыва суточной агаровой культуры в дозах 0,2-0,5 мл (200-500 млн микробных клеток). Определение чувствительности бактерий к антибиотикам проводили на среде АГВ путем наложения стандартных дисков с антибиотиками. Анти86 |
ции молочно-продуктивных животных, учитывали физиологическое состояние животных, возраст, уровень продуктивности. Для проведения клинического эксперимента использовали коров красной степной и черно-пестрой пород. Клинико-гинекологическому исследованию по общепринятой методике подвергну т 12408 отелившихся коров, из них у 314 животных проведены гематологическе, биохимические, иммунобиологические исследования. Для микробиологических исследований использовано 790 проб маточных выделений коров больных острым послеродовым эндометритом. Для исследований кровь от коров брали до кормления. При гематологических исследованиях определяли количество эритроцитов и лейкоцитов в камере с сеткой Горяева, выводили лейкоформулу по В .Г. Мухину, содержание гемоглобина (гемоглобинцианидным методом), высчитывали цветовой показатель, СОЭ в аппарате Панченкова, характер лейкограммы (микроскопией окрашенных по Романовскому-Гимзе мазках крови). Биохимические исследования состояли из определения в сыворотке крови общего белка (колориметрически), белковых фракций (нефелометрически), мочевины (цветной реакцией с диацетилмонооксимом и тиосемикарбазидом), общего кальция (с орго-кризолфталеином), неорганического фосфора (с ваиадат-молподатным реактивом), глюкозы (ферментативно). Активность трансаминаз, щелочной фосфатазы, билирубин, с помощью наборов фирмы «ДДС». Для определения факторов неспецифической резистентности использовали тест бактериального фагоцитоза нейтрофилов с учетом степени его завершенности по отношению к бактериям Staphylococcus aureus (№209 Р) по И.В. Нестеровой с соавт. (1996). Бактерицидную активность сыворотки крови (БАСК) определяли по О.В. Смирновой и Т.А. Кузьминой (1966), лизоцимную (ЛАСК) по Д.Г. Дорофейчук, Т-, В-, NK-лимфоциты методом Пирса в модификации Н.Н. Гугушвили с соавт. (2000) с прочным синим и нафтилацетатом. Для микробиологических исследований маточные истечения получали по меюдике Н.Н. Михайлова, М.А. Лучко и З.С. Конновой (1967). С целью 68 определения состава микрофлоры матки осуществляли посев полученного материала на МПА, МПБ, кровяной агар, МПА с 1% глюкозы, среды Эндо, Сабуро, кандида агар сусло-агар и др. Идентификацию изолированных микроорганизмов проводили с учетом их морфологических, культуральных свойств по общепринятым методикам. Для определения вида бактерий использовали пластины биохимические дифференцирующие энтеробактерии и стафилококки научно-производственного объединения «Диагностические системы», г. Нижний Новгород, углеводные среды Гиса. Видовую принадлежность бактерии устанавливали, руководствуясь «Определителем бактерий» Берги (1980) и рекомендациями Н.Н. Михайлова (1983), В.М. Карташовой с соавт. (1988). а грибов «Определителем патогенных, токсигенных и вредных для человека грибов» (1979) и также «Атласом грибов патогенных для сельскохозяйственных животных и птиц» (1953). Патогенность микроорганизмов изучали путем внутрибрюшного заражения белых мышей одномиллиардной взвесью смыва суточной агаровой культуры в дозах 0,2-0,5 мл (200-500 млн микробных клеток). Определение чувствительности бактерий к антибиотикам проводили на среде АГВ путем наложения стандартных дисков с антибиотиками. Антибактериальные средства лекарственных препаратов изучали луночным методом диффузии в агар (Е.А. Тебякин, С.М. Чайковская, 1959). Оценку чувствительности осуществляли по диаметру зоны задержки роста тест-кулыур. Пробы воздуха в животноводческих помещениях брали по методу Г.К. Волкова (1978). Для этого проводили замеры в трех точках помещения: с двух сторон в торцах, отступив от продольных стен на 1-Зм и от торцовых стен на 1м, а также в центре помещения. Пробы воздуха брали на высоте 60 и 120 см от уровня пола, чтобы охватить зоны лежания и стояния коров. В указанных точках расставляли бактериологические чашки в равных количествах с МПА и средой Сабуро с экспозицией 5 минут, затем чашки закрывали и ставили в термостат со средой МПА при температуре 37°С, а со средой Сабуро при 30°С. О микробной обсемененности судили по количеству выросших колоний. 69 |