Проверяемый текст
Феофанова Елена Сергеевна. Иммунологические маркеры кардиоваскулярного риска, эндотелиальная дисфункция и их динамика в зависимости от лечения у больных стабильной стенокардией напряжения II - III функционального класса на фоне подагры (Диссертация 2008)
[стр. 59]

59 Уровень зУСАМ-1 в крови определяли с помощью иммуноферментного анализа (ЗАО «БиоХимМак», Москва).
Характеристика эндотелиальной функции включала определение количества десквамированных (циркулирующих) эндотелиальных клеток
и содержания эндотелина-1 в крови обследованных.
Количество десквамированных эндотелиоцитов в крови определяли по методу Н1ас1оуес
.1.
(1978) [154].
Метод основан на изоляции клеток эндотелия вместе с тромбоцитами с последующим осаждением тромбоцитов с помощью аденозиндифосфата (АДФ).
Кровь из локтевой вены брали в количестве 5 мл в качестве стабилизатора добавляли 3,8% лимоннокислый натрий в соотношении 1:9.
Для получения богатой тромбоцитами плазмы сразу после взятия кровь центрифугировали 10 мин при
200&.
Затем 1 мл плазмы смешивали с 0,2 мл натриевой соли аденозиндифосфата (АДФ-Ыа) в концентрации 1 мг/мл.
Полученную смесь механически перемешивали в течение 10 мин аккуратным встряхиванием пробирок, после чего вновь центрифугировали в прежнем режиме для удаления агрегатов тромбоцитов.
Свободный от тромбоцитов супернатант переносили в другую емкость и центрифугировали при
200§ в течение 1$ мин для осаждения эндотелиальных клеток.
Затем надосадочную плазму аккуратно удаляли, а полученный осадок суспендировали в 0,1 мл 0,9% раствора
ЫаС1 и перемешивали стеклянной палочкой.
Готовой суспензией заполняли камеру Горяева.
Количество клеток эндотелия подсчитывали в 2 сетках камеры методом
фазовоконтрастной микроскопии.
Учитывая соотношение между количеством клеток в сетке и объемом камеры Горяева, объемом полученной суспензии и объемом
плазмы, при подсчете количества эндотелиальных клеток результат умножали на Ю4/л.
Образцы крови для последующего определения уровня эндотелина-1 отбирали в утренние часы (7.00-8.00) в охлажденные силиконовые пробирки с добавлением 2 мл 5% раствора трилона Б и центрифугировали при постоянном охлаждении со скоростью 6 тыс.
оборотов в 1 мин в течение 3 мин.
По
[стр. 56]

56 Характеристика эндотелиальной функции включала определение количества десквамированных (циркулирующих) эндотелиальных клеток й содержания эндотелина-1 в крови обследованных.
Количество десквамированных эндотелиоцитов в крови определяли по методу Н1ас1оуес
5.
(1978) [135].
Метод основан на изоляции клеток эндотелия вместе с тромбоцитами с последующим осаждением тромбоцитов с помощью аденозиндифосфата (АДФ).
Кровь из локтевой вены брали в количестве 5 мл в качестве стабилизатора добавляли 3,8% лимоннокислый натрий в соотношении 1:9.
Для получения богатой тромбоцитами плазмы сразу после взятия кровь центрифугировали 10 мин при
200с.
Затем 1 мл плазмы смешивали с 0,2 мл натриевой соли аденозиндифосфата (АДФ-Ыа) в концентрации 1 мг/мл.
Полученную смесь механически перемешивали в течение 10 мин аккуратным встряхиванием пробирок, после чего вновь центрифугировали в прежнем режиме для удаления агрегатов тромбоцитов.
Свободный от тромбоцитов супернатант переносили в другую ем кость и центрифугировали при
200& в течение 15 мишдля осаждения эндотелиальных клеток.
Затем надосадочную плазму аккуратно удаляли, а полученный осадок суспендировали в 0,1 мл 0,9% раствора
КаСГ и-первхмешивали стеклянной палочкой.
Готовой суспензией заполняли камеру Горяева.
Количество клеток эндотелия подсчитывали в 2 сетках камеры методом
фазовоконтрастиой микроскопии.
Учитывая соотношение между количеством клеток в сетке и объемом камеры Горяева, объемом полученной суспензии-и объемом
1 плазмы, при подсчете количества эндотелиальных, клеток результат умножали на 10‘Ул.
Образцы крови для последующего определения уровня эндотелина-1 отбирали в утренние часы (7.00-8.00) в охлажденные силиконовые пробирки с добавлением 2 мл 5% раствора трилона Б и центрифугировали при постоянном охлаждении со скоростью 6 тыс.
оборотов в 1 мин в течение 3 мин.
После
этого плазму крови немедленно замораживали и хранили при температуре не более 35 °С.
Определение уровня эндотелина-1 в образцах проводили с помощью

[Back]