|
Согласно данным фирмы производителя предел детекции : 0.5 нг/мл эта концентрация соответствует двум стандартным отклонениям от среднего значения 20-ти определений бланка. Норма —8,8-37,6 нг/мл. Рисунок 2. Образец калибровочной кривой при определении остеокальцина 4.3.2.2 Определение щелочной фосфатазы Определение щелочной фосфотазы производилось биохимическим методом с помощью набора Lachema. Костная щелочная фосфатаза продуцируется остеобластами, и ее синтез возрастает при активации дифференцировки этих клеток, происходящей в условиях ускоренного костеобразования. Предполагают, что КЩФ участвует в формировании и минерализации остеоида костного матрикса осуществляется при участии кальцитриола. и что ее действие |
откладывались скорректированные оптические плотности пяти стандартов (B-F), против соответствующих концентраций остеокальцина по оси абсцисс. Интерполяцией определясь концентрация остеокальцина контролей и образцов пациентов. Рисунок 2. Образец калибровочной кривой при определении остеокальцина 2.5 2 1.5 о . О ш 1 0,5 0 Н-----------------------------------1------------------------------------1-------------------------------------1-------------------------------------1------------------------------------1------------------------------------1 0 110 275 825 2475 7425 Концентрация остеокальцина Характеристики метода следующие: Согласно данным фирмы производителя предел детекции : 0.5 нг/мл эта концентрация соответствует двум стандартным отклонениям от среднего значения 20-ти определений бланка. Норма 8,8-37,6 нг/мл. 4.3.2.2 Определение щелочной фосфатазы Определение щелочной фосфотазы производилось биохимическим методом с помощью набора Lachema. Костная щелочная фосфатаза (КЩФ) продуцируется остеобластами, и ее синтез возрастает при активации дифференцировки этих клеток, происходящей в условиях ускоренного костеобразования. Предполагают, что КЩФ участвует в формировании и минерализации остеоида костного матрикса и что ее действие осуществляется при участии кальцитриола (7). Производилось определении каталитической концентрации щелочной фосфатазы в сыворотке крови методом константного времени. Принцип метода следующий. Щелочная фосфатаза (щелочная фосфогидролаза моноэстеров ортофосфорной кислоты, К.Ф. 3.1.3.1. ЩФ) расщепляет в Ы-метил-Оглюкаминовом буфере 4-нитрофенилфосфат с образованием 4нитрофенола и фосфата. ЩФ активирована хлоридом натрия. Мерой каталитической концентрации фермента является количество освобожденого 4-нитрофенола, который определяют фотометрически методом постаянного времени после остановки ферментативной реакции ингибитором ЩФ, который блокирует активный центр фермента. Нормальные величины: мужчины 0,90-2,3 мккат/л, женщины 0,74-2,1 мккат/л. Методом константого времени можно без разведения анализировать пробы до 7 мккат/л. При каталитической концентрации ЩФ, превышающей эти величины, пробы разводились физиологическим раствором и анализ производился повторно (результат х разведение). Величины ЩФ можно пересчитать на температуру ЗО'С с помощью фактора 0,70. Пересчет единиц 1 кат/л = 1 моль/л с 1 мккат/л = 60 Е/л. 4.4. Общеклинические и лабораторные методы исследования. Эффективность лечения больных оценивалась с помощью клинико-лабораторных и иммунобиохимических показателей, |